馬齒莧中甘菊藍結構新化合物及其提取分離方法
【專利摘要】本發明涉及中藥提取、分離領域，尤其涉及從馬齒莧中提取、分離和鑒別出的一種甘菊藍結構新化合物及其提取分離方法。一種甘菊藍結構新化合物，分子式為C13H18O2，命名為Oleracone B。還提供上述新化合物的提取分離方法，依次采用水煎煮提取、乙酸乙酯萃取、硅膠柱層析、ODS中壓柱、及SephadexLH?20，成功的提取分離出甘菊藍結構新化合物，該新化合物具有抗炎、鎮痛和抗腫瘤作用，本發明所述新化合物及其鹽或衍生物可以作為其他化合物合成先導物，以及新藥開發和藥理活性研究的原料，用于制備抗炎、治療疼痛和抗腫瘤的藥物或保健品。
【專利說明】
馬齒寬中甘菊藍結構新化合物及其提取分離方法
技術領域
[0001] 本發明設及中藥提取、分離領域，尤其設及從馬齒寬藥材中提取、分離和鑒別出的 一種甘菊藍結構新化合物及其提取分離方法。
【背景技術】
[0002] 馬齒寬(Portulaca oleracea L.)，又名長命菜、馬寬菜，為馬齒寬科植物。馬齒寬 耐旱耐潰，且耐光耐陰，分布廣泛，資源豐富，作為藥食兩用的野生植物備受關注，2015版 《中華人民共和國藥典》中收載馬齒寬的干燥地上部分入藥，具有清熱解毒、涼血止血、止頻 等功效，用于熱毒血頻、癡腫療瘡、濕疹、丹毒、蛇蟲咬傷、便血、持血、崩漏下血等。
[0003] 馬齒寬現代藥理學研究表明，其具有抗炎止痛、抗菌抗病毒、降血壓、降血脂、抗氧 化、抗癌、松弛骨骼肌和平滑肌、調節免疫功能等作用。研究表明馬齒寬中眾多化學成分，為 其多樣的藥理作用提供了物質基礎，馬齒寬主要化學成分包括黃酬類、香豆素、祗類、醬類、 生物堿、氨基酸、各種色素類和礦物質類等。其中生物堿是馬齒寬中一類主要的化學成分， 目前已報道的生物堿類成分有去甲腎上腺素、多己胺、少量多己、腺巧、尿喀晚、腺嚷嶺、N， N-二環己基脈、尿囊素、N-反式-阿魏酷基酪胺;還有環二膚生物堿和酷胺類生物堿:馬齒寬 酷胺 A-I、K、L、N-S。
[0004] 目前從馬齒寬中分離出的化學成分大多數是已知的，且結構新穎性較低，因此，對 馬齒寬中新化合物的開發和分離是亟待需要的。

【發明內容】

[0005] 針對上述問題，本發明提供從馬齒寬中提取的一種甘菊藍結構新化合物，經研究 發現其具有抗炎、鎮痛、抗腫瘤的作用；同時提供一種針對本發明新化合物的簡便、快速、環 保、純度高的提取分離方法。
[0006] 為實現本發明的上述目的，本發明提供一種甘菊藍結構新化合物，分子式為 Cl出18〇2，命名為Oleracone B，化學結構式為：
[0007]
0- )
[000引為實現本發明的上述目的，本發明還提供一種馬齒寬中甘菊藍結構新化合物的提 取分離方法，具體步驟為。
[0009] 步驟1、取馬齒寬干燥藥材，采用水煎煮提取，水提液濾過，合并濾液直接加熱濃 縮，放涼至室溫，得藥液備用。
[0010] 步驟2、將步驟1中藥液用乙酸乙醋反復萃取，減壓回收乙酸乙醋至浸膏，得到乙酸 乙醋萃取物。
[0011] 步驟3、將步驟2中乙酸乙醋萃取物經硅膠柱層析分離，依次用石油酸-丙酬梯度洗 脫得到若干洗脫部位，經薄層色譜進行檢測，顯色，合并顯色的洗脫部位，將合并后的洗脫 部位經減壓濃縮至干，得到濃縮物備用。
[0012] 步驟4、將步驟3中所得濃縮物再經預處理的0DS柱(Octadecylsilyl，十八烷基娃 燒鍵合硅膠填料)層析分離，用甲醇-水梯度洗脫，得到若干洗脫部位，經薄層色譜進行檢 巧。，顯色，將各顯色的洗脫部位分別減壓濃縮至干，得到濃縮物備用。
[0013] 步驟5、將步驟4中所得各濃縮物經預處理的S邱hadex LH-20(^丙基葡聚糖凝膠） 層析分離，分別W甲醇-水梯度洗脫，得到一種來源于馬齒寬的甘菊藍結構新化合物。
[0014] 所述0DS和S邱hadex LH-20凝膠的預處理過程為甲醇浸泡過24小時，上柱，用甲醇 洗至滴入水中無混濁，再W初始流動相平衡。
[0015] 與現有技術相比本發明的有益效果。
[0016] 本發明中所述馬齒寬甘菊藍結構新化合物的分離和藥理活性研究未被現有的論 文期刊所報道;本發明提供一種來源于馬齒寬的甘菊藍結構新化合物W及一種針對本發明 新化合物的提取分離方法，依次采用水煎煮提取、乙酸乙醋萃取、硅膠柱層析、0DS中壓柱、 及S邱hadex LH-20，成功提取分離出甘菊藍結構新化合物，該方法操作步驟僅為五步，操作 方法簡便及快速;提取分離過程主要采用水提取及乙酸乙醋萃取，工藝方法環保;且經該方 法分離得到的化合物純度較高，均大于90%;此外經研究表明W上所述化合物具有抗炎、鎮 痛和抗腫瘤作用，因此本發明新化合物及其鹽和衍生物可W作為其他化合物合成先導物， W及新藥開發和藥理活性研究的原料，亦可用于制備抗炎、治療疼痛和抗腫瘤的藥物。
【附圖說明】
[0017] 圖1為本發明甘菊藍結構新化合物Oleracone B的紫外光譜圖。
[0018] 圖2為本發明甘菊藍結構新化合物Oleracone B的紅外光譜圖。
[0019] 圖3為本發明甘菊藍結構新化合物Oleracone B的高分辨質譜圖。
[0020] 圖4為本發明甘菊藍結構新化合物Oleracone B iH-NMR光譜圖。
[0021] 圖5為本發明甘菊藍結構新化合物Oleracone B Uc-NMR光譜圖。
[0022] 圖6為本發明甘菊藍結構新化合物Oleracone B的核磁共振碳譜(DEPT)光譜圖。
[0023] 圖7為本發明甘菊藍結構新化合物Oleracone B的核磁共振iH-i肥0SY光譜圖。
[0024] 圖8為本發明甘菊藍結構新化合物Oleracone B的核磁共振HMBC光譜圖。
[0025] 圖9為本發明甘菊藍結構新化合物Oleracone B的核磁共振服QC光譜圖。
[00%]圖10為本發明甘菊藍結構新化合物Oleracone B的核磁共振N0ESY光譜圖。
【具體實施方式】
[0027] 實施例1。
[0028] 本發明提供一種甘菊藍結構新化合物，分子式為打抽18〇2，化學結構式為。
[0029]
[0030] 所述甘菊藍結構新化合物根據結構命名為Oleracone B，表1為該甘菊藍結構新化 合物的核磁數據:iH-NMR與Uc-NMR在CDC13中。
[0031 ]表1:本發明甘菊藍結構新化合物化合物Oleracone B的核磁數據。
[0032]
[0033]
[0034] 請參閱圖1-10,本發明所述的甘菊藍結構新化合物的結構鑒定與推導。
[00；3日]Oleracone B:無色油狀物，[α]% 〇(c 0.1 ,MeOH)，易溶于氯仿和甲醇等，不溶、微 溶于水。UV(MeOH)Amax:295nm，IRv〇-H 3420,化=0 1760,化=c1659，1625，v〇-h 1310,化=0 1203， 丫=cH 893cm-l，HRESI( + )T0FMS給出m/z:207.1389[M+HΓ的準分子離子峰，分子量為 206.1310。結合iH-NMR，"C-NMR W及DEPT數據，推測該化合物可能的分子式為Ci3出802，不飽 和度為5。"C-NIR譜和DEPT譜顯示13個碳信號，分別3個C也(δ: 23.0，24.3，24.4)、3個C也(δ; 27.5,27.6,49.1)、2個CH(S :122.1,123.5)、5 個季碳(一個幾基碳，199.7;兩個雙鍵碳，δ; 149.9,154.1;兩個脂肪碳，δ :39.8,71.3)。
[0036] iH-NMR 譜顯示3 個甲基信號，分別為 δl.00(3H，s)，δl.l3(3H，s)，δl.93(3H，s)。3個 亞甲基信號為δ1.75(lH，dd，J = 5.0,1.7)，δ1.97(lH，dd，J = 5.0,1.7) ;S2.17(lH，d，J = 5)， 62.47(^，(1^ = 5)和62.07(^，(1^=15.0)，62.88(^，(1^=15.0)，2個次甲基信號為5 5.67(lH，s)，δ6.00αH，s)。由H-HC0SY譜可知，有相互禪合關系的H為δl.00與δl.l3，δl.93 與δ6.00，δ1.97與δ5.67。其中δ1.93化學位移較大，說明該甲基可能與雙鍵相連。
[0037] 根據HMBC相關譜所列如下信息，出-1/與C-3a和C-8;也-2與C-1，C-3a，C-8和C-8a; Hb-2 與 C-6;出-9 與 C-2，C-3，C-3a 和 C-10;出-10 與 C-3，C-3a和C-9;此-4 與 C-3，C-3a和C-5; Hb- 6 與 C-4，C-7，C-8和 C-11; Hi-8 與 C-1，C-3a，C-6，C-fe和C-11;出-11 與 C-6，C-7 和C-8之間的相 互禪合，可W推斷出該化合物基本骨架為多取代的甘菊藍環狀結構，結合H-H COSY譜所示 信息可知甲基C-11與C-7相連，甲基C-9和C-10均連接在C-3上.由于C-6化學位移偏高，推斷 其與C-5所在幾基相連接。除上述各基團外，由紅外光譜所示V0-H 3420信號，可知該化合物 有一個徑基，同時，C-：3a出現在碳譜高場區，故推斷該徑基與C-3a相連，綜上所述，可確定該 新化合物為上述結構。
[0038] 本發明還提供上述甘菊藍結構新化合物的提取分離方法，具體步驟為：
[0039] 步驟1:稱取馬齒寬干燥藥材150kg，采用水煎煮提取，水用量為藥材的8~16倍，煎 煮提取兩次，每次煎煮2小時，水提液濾過，合并濾液直接加熱濃縮，放涼至室溫，得藥液備 用。
[0040] 步驟2:將步驟1中所得藥液，用乙酸乙醋反復萃取3次，乙酸乙醋與濃縮液的體積 比例為l:l(v:v)，4(rcw下減壓回收乙酸乙醋至浸膏，得到乙酸乙醋萃取物。
[0041] 步驟3:將步驟2中所得乙酸乙醋萃取物干法上樣，經硅膠柱層析分離，其中硅膠為 200~300目，依次用石油酸-丙酬（l:l、l:2、l:3、l:5，v:v)梯度洗脫，共得到150個部位（即 共得到150個瓶，每瓶400mL)，經薄層色譜進行檢測，顯色，合并顯色的90~130洗脫部位（即 合并顯色的90~130瓶，棄去1~89瓶與131~150瓶），將合并后的90~130部位經40°CW下 減壓濃縮至干，備用。
[0042] 步驟4:將步驟3中所得物再經預處理的0DS中壓柱層析分離，其中填料粒度為20~ 40μπι;用甲醇-水（10/90，30/70，50/50，70/30，100/0，v/v)梯度洗脫（加壓，使流速為 1ml/ min,溫度為室溫），得到10個部位（即梯度洗脫得10個瓶，每瓶200mL)，經薄層色譜進行檢 巧。，顯色，將顯色的部位分別合并，50°C W下減壓濃縮至干，備用。所述0DS的預處理過程為 甲醇浸泡過24小時，上柱，用甲醇洗至滴入水中無混濁，再W初始流動相平衡。
[0043] 步驟5:將步驟4中所得各顯色部位經預處理的Se地adex LH-20柱層析，分別W甲 醇-水(70/30，v/v)等度洗脫，得到甘菊藍結構新化合物。經超高效液相色譜，歸一法測定純 度為90~99 %。所述Se地adex LH-20凝膠的預處理過程為甲醇浸泡過24小時，上柱，用甲醇 洗至滴入水中無混濁，再W初始流動相平衡。
[0044] 本發明甘菊藍結構新化合物的抗炎作用。
[0045] 1主要材料。
[0046] 1.1藥品和試劑：實驗所用甘菊藍結構新化合物由上述方法制備，純度為90~ 99%，精密稱取，用DMS0稀釋至下述各劑量組所需溶液。DMEM高糖培養基、胎牛血清（美國 Hyclone公司）；青霉素、鏈霉素(杭州四季青公司）；LPS(美國Sigma公司）；IL-6、TNF-a、PGE2 的化ISA試劑盒(美國化yman公司）；細胞裂解液、Griess試劑(碧云天生物技術有限公司）。
[0047] 1.2細胞株:RAW264.7巨隧細胞(美國ATCC細胞庫）。
[004引 1.3分組:分為對照組、LPS組和實驗組，各一組。
[0049] 2實驗方法。
[0050] 2.1細胞培養，DMEM高糖培養基，加入10 %的胎牛血清，1 %抗菌素（lOOU/mL青霉素 和1 OOyg/mL鏈霉素），置于37 °C、5 % C〇2培養箱中培養。
[0化1 ] 2.2MTT比色法測定細胞活力，上述Ξ組分別取對數生長期RAW264.7巨隧細胞接種 于96孔培養板中，細胞密度為1 X ΙΟ4個/mL，每孔10化L，溫度37°C，5 %C〇2條件下培養過夜 后，實驗組加入不同濃度的本發明新化合物oleracone Β(Ι-100μΜ)，解育化后向LPS組和實 驗組分別加入終濃度為化g/mL的LPS，另設一個調零組(含DMS0溶媒的培養液），每組設3個 復孔，考察加入藥物后對細胞的影響。上述各組細胞培養2地后，在各孔細胞中加入5mg/mL MTT 2化L，溫度37 °C，5 %C〇2條件下繼續解育4h后，終止培養，吸棄孔內液體，每孔加入10化 L二甲基亞諷(DMS0)，振蕩lOmin，使細胞內結晶充分溶解，酶標儀570nm波長處測定各孔吸 光值。
[0052] 2.3格里斯(Griess)法測定NO的含量:考察本發明新化合物對LPS誘導的小鼠巨隧 細胞RAW264.7的NO產生量的抑制作用。小鼠巨隧細胞RAW264.7傳代后在含10 %胎牛血清的 高糖細胞培養基DMEM中培養，實驗組加入不同濃度的本發明新化合物oleracone Β(1-50μ Μ)，在37°C，5%C02條件下解育化后用LPS(終濃度為化g/mL)誘導炎癥反應，24h后收集上清 液，每組處理重復3孔。Griess法測定細胞上清液中NO的含量，根據不同濃度本發明新化合 物對LI^誘導的RAW264.7細胞釋放NO的影響，用W反映 NO水平。
[0053] 2.4ELISA法測定炎癥因子IL-6、TNF-a和炎癥介質PGE2:將對數生長期RAW264.7巨 隧細胞接種于24孔培養板中，細胞密度為1 X 105個/mL，每孔ImL，溫度37°C，5%C02條件下培 養過夜，實驗組加入本發明新化合物oleracone B( 1-50μΜ)，培育化后，在每孔加入LPS(終 濃度為lyg/mL)，共解育24h，每組處理重復3孔。ELISA法測定本發明新化合物處理后的 RAW264.7巨隧細胞分泌的IL-6、TNF-a和PGE2的含量。
[0化4] 3實驗結果。
[0055] 實驗結果表明本發明新化合物對LPS誘導的巨隧細胞RAW264.7的增殖無影響，安 全無毒;并可有效抑制LPS誘導的巨隧細胞RAW264.7所產生過量炎癥細胞因子IL-6、TNF-a 和炎癥介質NO、PGE2,且呈濃度依賴。
[0056] 細胞相對存活率實驗結果如表2所示。
[0化7] 表2:本發明對RAW264.7巨隧細胞相對存活率的影響。
[0化引 [0化9]
[0060] 注:吁<0.05與對照組比較，高濃度組有顯著性差異。
[0061] 利用格里斯(Griess)法測定NO的含量實驗結果見表3。
[0062] 表3:本發明對LI^誘導的RAW264.7細胞釋放NO的影響（均數±標準差，η = 3)。
[0063]
[0064] 注:吁<0.05與對照組比較，咕<0.05與LI^組比較。
[00化]ELISA法測定炎癥因子IL-6、TNF-a和炎癥介質PGE2結果如表4所示。
[0066] 表4:本發明對LPS誘導的RAW264.7細胞分泌的IL-6、TNF-a和PGE2含量的影響（均 數+標準差，n = 3)。
[0067]
[006引注:吁<0.05與對照組比較，咕<0.05與LI^組比較。
[0069] 本發明甘菊藍結構新化合物的鎮痛作用。
[0070] 1主要藥品和試劑。
[0071] 實驗所用甘菊藍結構新化合物由上述方法制備，純度為99%，精密稱取，用生理鹽 水稀釋至下述各劑量組所需溶液。致痛劑為0.6 %乙酸，用生理鹽水配制。鹽酸嗎啡注射液 (沈陽第一制藥廠），用生理鹽水稀釋至下述劑量溶液。
[0072] 2實驗動物。
[0073] 昆明種雄性小鼠，體重為20±2g，清潔級，由大連醫科大學實驗動物中屯、提供。室 溫20~25°C，自由飲食，實驗室適應一周后用于實驗。
[0074] 3實驗方法。
[0075] 取健康小鼠，雌雄各半，共50只小鼠，體重20±2g，隨機分為空白對照組、實驗組 (分別為本發明甘菊藍結構新化合物高劑量組(4mg/kg)、本發明甘菊藍結構新化合物中劑 量組(2mg/kg)、本發明甘菊藍結構新化合物低劑量組（Img/kg))、陽性藥組(5mg/kg)共計五 組，每組10只。
[0076] 各組小鼠灌胃給予受試藥物，每日兩次，連續給藥3天。空白對照組給予等體積的 生理鹽水，陽性藥組給予鹽酸嗎啡注射液。末次給藥1小時后，各組小鼠腹腔注射0.6%乙酸 (0.1 mL/lOg體重），觀察30分鐘內各組小鼠扭體出現時間、扭體次數、扭體結束時間，與空白 對照組比較計算各組鎮痛抑制率。按下式計算鎮痛抑制率，對各組小鼠扭體次數進行統計 分析，P<〇. 05為有顯著差異。
[0077] 抑制率％ =(空白對照組平均扭體數一給藥組平均扭體數)/空白對照組平均扭體 數 X100%。
[007引 4實驗結果。
[0079] 空白對照組小鼠腹腔注射乙酸后表現為顯著的扭體次數多，表現出強烈的疼痛反 應;與空白對照組比較，中、高劑量組及陽性藥組扭體次數及扭體結束時間均有減少趨勢， 本發明甘菊藍結構新化合物高劑量組、中劑量組、低劑量組及陽性藥組潛伏期均有不同程 度延長趨勢。結果表明本發明甘菊藍結構新化合物對乙酸致小鼠扭體反應有一定的鎮痛作 用。具體實驗結果如表5所示。
[0080] 表5:本發明對乙酸致扭體反應小鼠的鎮痛作用影響（均數±標準差，n = 10)。
[0081]
[008^ 注:中<0.05，*午<0.01，**午<0.001與空白對照組比較。
[0083] 本發明甘菊藍結構新化合物的抗腫瘤作用。
[0084] 1主要材料。
[0085] 1.1藥品和試劑：實驗所用甘菊藍結構新化合物由上述方法制備，純度為90~ 99%，精密稱取，用DMS0稀釋至下述各劑量組所需溶液。DMEM高糖培養基、胎牛血清（美國 Hyclone公司）；青霉素、鏈霉素(杭州四季青公司）。
[00化]1.2細胞株:人結腸癌細胞化CO-2、人乳腺癌細胞MCF-7、人胃癌細胞BGC-823、人肺 腺癌細胞SPC-A1、人肝癌細胞肥k7402、人宮頸癌細胞化la-229、卵巢癌細胞化-8910、人類 口腔表皮樣癌細胞KB (中科院上海細胞庫）。
[0087] 1.3分組:分為對照組、實驗組和調零組(含DMS0溶媒的培養液）。
[008引2實驗方法。
[00例 2.1細胞培養，DMEM高糖培養基，加入10 %的胎牛血清，1 %抗菌素（lOOU/mL青霉素 和1 OOyg/mL鏈霉素），置于37 °C、5 % C02培養箱中培養。
[0090] 2.2Μ??法檢測細胞增殖，取對數生長期細胞接種于96孔培養板中，細胞密度為IX 104個/mL，每孔l(K)yL，溫度37°C，5%C02條件下培養過夜后，實驗組加入不同濃度的本發明 新化合物，每組設3個復孔，加藥后置于37 °C，5 % C〇2培養箱中培養4她。將含藥培養液吸去， 加入體積比為4:1的無血清培養液和MTT(終質量濃度為5mg/mL)共lOOmL，繼續解育4h，小屯、 吸去上清液后，每孔加入DMS015化L，放于震蕩器上震蕩W使結晶完全溶解(5min)，酶標儀 在570nm波長下檢測各孔的吸光度(A)值。然后，計算各濃度化合物對細胞生長的抑制率，抑 制率公式:細胞生長抑制率=X 100%，再應用SPSS軟件處理數據，將抑制率 對藥物濃度作曲線，計算IC50值。
[0091] 3實驗結果。
[0092] 實驗結果表明本發明新化合物對人結腸癌細胞化CO-2、人乳腺癌細胞MCF-7、人胃 癌細胞BGC-823、人肺腺癌細胞SPC-A1、人肝癌細胞肥心7402、人宮頸癌細胞化la-229、卵巢 癌細胞化-8910、人類口腔表皮樣癌細胞KB、的增殖具有抑制作用，且隨藥物濃度增大，抑制 率也明顯升高，即呈濃度依賴。本發明新化合物對上述八種腫瘤細胞IC50值見表6。
[0093] 表6本發明新化合物對腫瘤細胞的抑制作用。 Γ00941
[0095]綜上所述，本發明提供一種甘菊藍結構新化合物及其提取分離方法，依次采用水 煎煮提取、乙酸乙醋萃取、硅膠柱層析、0DS中壓柱層析、及S邱hadex LH-20柱層析，成功的 提取分離出甘菊藍結構新化合物，該方法簡便，快速，環保，且經該方法分離得到的化合物 純度較高，由于所得該化合物化學結構獨特，從常用中藥馬齒寬中提取出來，其具有抗炎、 鎮痛、抗腫瘤作用，因此本發明新化合物及其鹽和衍生物可W作為天然產物開發中藥新藥， 具有廣闊的前景。
【主權項】
1. 一種馬齒寬中甘菊藍結構新化合物，其特征在于，分子為Cl抽18〇2，命名為B，化學結構 式如下。2. 如權利要求1所述的新化合物的提取分離方法，其特征在于，具體步驟為： 步驟1取馬齒干燥藥材，采用水煎煮提取，水提液過濾，合并濾液直接加熱濃縮，放涼 至室溫，得藥液備用； 步驟2將步驟1中所得藥液用乙酸乙醋反復萃取，減壓回收乙酸乙醋至浸膏，得到乙酸 乙脂萃取物； 步驟3將步驟2中乙酸乙脂萃取物經硅膠柱層析分離，依次用石油酸-丙酬梯度洗脫得 到若干洗脫部位，經薄層色譜進行檢測，顯色，合并顯色的洗脫部位，將合并后的洗脫部位 經減壓濃縮至干，備用； 步驟4將步驟3中所得物再經預處理的ODS柱(Octadecylsilyl，十八烷基硅烷鍵合娃 膠填料)層析分離，用甲醇-水梯度洗脫，得到若干洗脫部位，經薄層色譜進行檢測，顯色，將 各顯色的洗脫部位分別減壓濃縮至干，得濃縮物備用； 步驟5將步驟5中所得各濃縮物經預處理的S邱hadex LH-20(^丙基葡聚糖凝膠)層析 分離，分別W甲醇-水梯度洗脫得到一種馬齒寬來源甘菊藍結構新化合物。3. 如權利要求2所述提取分離方法，其特征在于，所述步驟1中水煎煮提取兩次，每次煎 煮2小時，水用量為藥材的8~16倍。4. 如權利要求2所述的提取分離方法，其特征在于，所述0DS和S邱hadex LH-20的預處 理過程為甲醇浸泡過24小時，上柱，用甲醇洗至滴入水中無混濁，再W初始流動相平衡。5. 如權利要求1所述的提取分離方法，其特征在于，所述步驟2中濃縮液用乙酸乙醋萃 取3次，乙酸乙醋與濃縮液的體積比為1:10。6. 如權利要求1所述的化合物用于制備抗炎、鎮痛和抗腫瘤的藥物或保健品。
【文檔編號】A61P35/00GK106083556SQ201610393807
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年6月6日 公開號201610393807.5, CN 106083556 A, CN 106083556A, CN 201610393807, CN-A-106083556, CN106083556 A, CN106083556A, CN201610393807, CN201610393807.5
【發明人】英錫相, 英哲銘, 李翠玉, 張文潔
【申請人】遼寧中醫藥大學