一種從草豆蔻中分離純化榿木酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素的方法
【專利摘要】本發明提供了一種從草豆蔻中分離純化榿木酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素的方法。草豆蔻藥材粉碎，加入70%乙醇超聲提取，將提取液過濾、減壓濃縮得草豆蔻浸膏；將浸膏用甲醇溶解，經過濾后，進行超臨界流體色譜分離，色譜柱為二醇基柱，流動相為超臨界CO2流體，改性劑為乙醇。本發明使用二氧化碳作為主要流動相，加入少量有機溶劑作為改性劑，對環境和人體健康產生危害的小，且二氧化碳回收利用容易，能耗低，生產成本低，生產過程綠色環保；同時產物易于回收，所得產品無有害物質殘留。
【專利說明】
一種從草豆蔻中分離純化榿木酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素 的方法
技術領域
[0001] 本發明屬于化工與制藥領域，具體是涉及一種從草豆蔻提取物中分離純化榿木 酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素的超臨界流體色譜方法。
【背景技術】
[0002] 草豆蔻為姜科植物草豆蔻的干燥近成熟種子團，氣香，味辛，微苦，具有燥濕健脾， 溫胃止嘔的作用，臨床上廣泛用于治療寒濕內阻，脘腹脹滿冷痛，噯氣嘔逆，不思飲食等癥 狀。前期研究表明山姜素、喬松素、小豆蔻明、榿木酮在草豆蔻中含量最高，具有抗炎抑菌、 降血糖、抗氧化、抗輻射、抗癌、抗腫瘤以及增強免疫力等藥理作用。
[0003] 對草豆蔻有效成分的分離方法主要有高速逆流色譜法和硅膠柱層析。柱層析雖然 得到的化合物純度高，但操作繁瑣，高速逆流色譜法中溶劑體系的選擇比較困難，分離規模 難以擴大。此外，兩種方法均需要消耗大量的有機溶劑，有機溶劑的回收成本高，回收再利 用比較困難，產品中有機試劑殘留嚴重，對環境和人體健康有較大的危害。

【發明內容】

[0004] 本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種操作簡便、分離量大、綜合成本 低、綠色環保的快速純化制備草豆蔻中榿木酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素的方法，通過一步 分離純化即可從草豆蔻提取物中得到高純度的榿木酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素。
[0005] 本發明的方案如下： 一種從草豆蔻中分離純化榿木酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素的方法，步驟為： 步驟1:草豆蔻藥材粉碎，加入乙醇超聲提取，將提取液過濾、減壓濃縮得草豆蔻浸膏。
[0006] 步驟2:將草豆蔻浸膏用甲醇溶解，經過濾后，進行超臨界流體色譜分離，流動相為 超臨界流體/改性劑二元體系。分離過程由紫外檢測器檢測，根據檢測信號收集目標組分餾 分。
[0007] 前面所述的方法，優選的方案是，步驟1中乙醇超聲提取乙醇濃度為50%~100%，最 優為70%;乙醇超聲提取乙醇與藥材的比例是5:1~15:1，最優為10:1;提取的次數為3次，每 次超聲時間為〇. 5-2.5小時，最優為0.5小時。
[0008] 前面所述的方法，優選的方案是，步驟2中過濾所用濾膜為0.45 μπι濾膜。
[0009]前面所述的方法，優選的方案是，步驟2中色譜柱為C18柱、氨基柱、二醇基柱，最優 為二醇基柱。
[0010]前面所述的方法，優選的方案是，步驟2中超臨界流體為超臨界二氧化碳，超臨界 二氧化碳的壓力為10~14 MPa，最優為llMPa;超臨界二氧化碳的流速為2-5倍柱體積/分鐘， 最優為3倍柱體積/分鐘。
[0011]前面所述的方法，優選的方案是，步驟2中改性劑為甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈，最優 為乙醇；乙醇的比例為5%~15%，最優為10%。
[0012] 前面所述的方法，優選的方案是，步驟2中色譜柱溫度為30~50°C，最優為35°C。
[0013] 本發明一種從草豆蔻中分離純化榿木酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素的方法，具有 如下優勢： (1)所得到的草豆蔻提取物中有效成分含量高(從圖1可以看出）。
[0014] (2)不需要像已有技術一樣對樣品進行多次分離純化，只需要一個分離步驟即可 得到多種高純度成分，經過一步分離純化就可以得到榿木酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素4種 化合物。
[0015] (3)純化過程中使用超臨界二氧化碳，無毒、無污染，生產過程綠色環保，所得產品 無有害物質殘留。
[0016] (4)二氧化碳回收利用容易，能耗低，生產成本低。
[0017] (5)方法操作簡單，易于自動化控制，效率高，工藝周期短。
【附圖說明】
[0018] 圖1是實施例1超臨界流體色譜圖。
【具體實施方式】
[0019] 下面結合實施例和附圖詳細說明本發明的技術方案，但保護范圍不被此限制。實 施例中所用設備或原材料皆可從市場獲得。所用試劑均為分析純，購自天津試劑四廠，所用 二氧化碳為高純二氧化碳。
[0020] 實施例1 稱取草豆蔻100 g，用粉碎機粉碎，放入玻璃容器中，加入1000 m170%乙醇，超聲提取3 次，每次0.5小時，合并提取液，過濾、減壓濃縮得草豆蔻浸膏。
[0021] 將草豆蔻浸膏用甲醇溶解，經過濾后，進行超臨界流體色譜分離，色譜柱為二醇基 柱，色譜柱溫度為35°C。流動相為超臨界二氧化碳，流速為3倍柱體積/分鐘，壓力為11 MPa。 改性劑為乙醇，其比例為10%。分離過程由紫外檢測器檢測，檢測波長為300nm，根據檢測信 號收集目標組分餾分，分別得到榿木酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素4種化合物。
[0022] 實施例2 稱取草豆蔻100 g，用粉碎機粉碎，放入玻璃容器中，加入1500 ml70%乙醇，超聲提取3 次，每次0.5小時，合并提取液，過濾、減壓濃縮得草豆蔻浸膏。
[0023]將草豆蔻浸膏用甲醇溶解，經過濾后，進行超臨界流體色譜分離，色譜柱為二醇基 柱，色譜柱溫度為30°C。流動相為超臨界二氧化碳，流速為4倍柱體積/分鐘，壓力為10 MPa。 改性劑為乙醇，其比例為8%。分離過程由紫外檢測器檢測，檢測波長為300 nm，根據檢測信 號收集目標組分餾分，分別得到榿木酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素4種化合物。
[0024] 實施例3 稱取草豆蔻100 g，用粉碎機粉碎，放入玻璃容器中，加入500ml 70%乙醇，超聲提取3 次，每次1.5小時，合并提取液，過濾、減壓濃縮得草豆蔻浸膏。
[0025]將草豆蔻浸膏用甲醇溶解，經過濾后，進行超臨界流體色譜分離，色譜柱為二醇基 柱，色譜柱溫度為40°C。流動相為超臨界二氧化碳，流速為2.5倍柱體積/分鐘，壓力為12 MPa。改性劑為乙醇，其比例為7%。分離過程由紫外檢測器檢測，檢測波長為300 nm，根據檢 測信號收集目標組分餾分，分別得到榿木酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素4種化合物。
[0026]經HPLC面積歸一化法分析測試，實施例1-3所得到的各個組分的純度很高，均在 98%以上。
[0027]經NMR、MS鑒定，圖1中A、B、C、D分別代表榿木酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素，其化學 結構如下：
【主權項】
1. 一種從草豆蔻中分離純化榿木酮、松屬素、小豆蔻明、山姜素的方法，其特征是，步驟 為： 步驟1:草豆蔻藥材粉碎，加入乙醇超聲提取，將提取液過濾、減壓濃縮得草豆蔻浸膏； 步驟2:將草豆蔻浸膏用甲醇溶解，經過濾后，進行超臨界流體色譜分離，流動相為超臨 界流體/改性劑二元體系;分離過程由紫外檢測器檢測，根據檢測信號收集目標組分餾分。2. 根據權利要求1所述的方法，其特征是，步驟1中乙醇超聲提取乙醇濃度為50%~ 100%，最優為70%;乙醇超聲提取乙醇與藥材的比例是5:1~15:1，最優為10:1;提取的次數 為3次，每次超聲時間為0.5-2.5小時，最優為0.5小時。3. 根據權利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中過濾所用濾膜為0.45 μπι濾膜。4. 根據權利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中色譜柱為C18柱、氨基柱、二醇基柱，最 優為二醇基柱。5. 根據權利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中超臨界流體為超臨界二氧化碳，超臨 界二氧化碳的壓力為10~14 MPa，最優為llMPa;超臨界二氧化碳的流速為2-5倍柱體積/分 鐘，最優為3倍柱體積/分鐘。6. 根據權利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中改性劑為甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈， 最優為乙醇；乙醇的比例為5%~15%，最優為10%。7. 根據權利要求1所述的方法，其特征是，步驟2中色譜柱溫度為30~50 °C，最優為35 °C。
【文檔編號】C07C45/78GK105837546SQ201610268195
【公開日】2016年8月10日
【申請日】2016年4月27日
【發明人】王延翠, 孫愛玲, 李愛峰, 秦秀秀, 柳仁民
【申請人】聊城大學