專利名稱：用于治療的嗎啉代基取代的化合物的制作方法
背景技術：
1.發明領域本發明廣泛涉及抗血栓形成的嗎啉代基取代的化合物和相應的使用方法。更具體地說，本發明涉及嗎啉代基取代的吡啶并嘧啶、喹諾酮和苯并吡喃酮衍生物，它們抑制酶磷酸肌醇(PI)3-激酶，并且它們用于治療PI 3-激酶依賴性疾病，包括心血管疾病、呼吸疾病、炎性疾病、腫瘤例如癌癥和與不正常的白細胞功能有關的疾病。
2.相關領域的描述細胞相互粘附作用對廣泛的生理過程包括炎癥、免疫和止血過程是至關重要的。血小板是特殊的粘附細胞，它們在止血過程中起重要的作用。在血管損傷的情況下，血小板粘附于特定的內皮下粘附蛋白，例如馮維勒布蘭德因子(vWF)。vWF結合于血小板表面的它的特異性受體，糖蛋白(GP)Ib/V/IX，誘導血小板激活和細胞骨架再組織。這些細胞骨架的變化導致線性偽足伸展和片狀偽足片的形成，其為血小板擴散和初級止血的血小板塞形成的必需過程。
動脈粥樣斑塊破裂部位上的過度血小板粘附反應通常導致血管-閉塞的血小板血栓的形成。在冠狀或腦循環中這些血栓的形成分別導致心臟病發作和中風，它們合起來代表工業化社會中死亡的主要原因。血小板血栓形成也導致多種其它的臨床癥狀，包括不穩定性心絞痛、猝死、一過性局部缺血發作、一時性黑矇以及四肢和內部器官的急性局部缺血。
然而，不合乎需要的血栓形成也可與侵入的醫療過程例如心臟外科手術(例如血管成形術)、腹胸外科手術、動脈外科手術、器具(例如斯騰特固定膜或導管)的配置和動脈內膜切除術有關。另外，血栓形成可伴隨多種血栓栓塞疾病和凝血病，例如中風、肺栓塞(例如具有栓塞的心房纖維性顫動)和彌散性血管內凝血。有害的血栓也能夠由體液的處理產生，如發生在輸血或體液取樣中，以及發生在包括體外循環(例如心肺旁路手術)和透析的過程中。
抗凝血藥和抗血小板藥通常用于緩解血栓形成。通過給予合適的抗凝血藥，包括一種或更多種香豆素衍生物(例如華法林和雙香豆素)或帶電的聚合物(例如肝素、水蛭素或hirulog)，或通過使用抗血小板藥(例如阿司匹林、氯吡格雷、噻氯匹定、雙嘧達莫或幾種GPIIb/IIIa受體拮抗劑中的一種)，在許多情況下能夠減少或消除血塊。但是抗凝血藥和血小板抑制劑可能具有副作用，例如出血、再閉塞、“白血塊”綜合征、刺激、生育缺陷、血小板減少和肝功能障礙。此外，長期給予抗凝血藥和血小板抑制劑尤其可能增加威脅生命的疾病或出血的風險。
發明概述在使用抑制或預防不合乎需要的血栓形成的抗凝血藥或抗血小板藥中，為避免前述的缺點，本發明的一個目的是提供具有下式的抗血栓形成的嗎啉代基取代的吡啶并嘧啶衍生物 R為H、OH、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、芳基或(CH2)n-芳基；R1為H、OH、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、C3-C6環烷基、CH＝CH-芳基、C≡C-芳基、(CHR3)n-芳基、NR3-C1-C6烷基、NR3-環烷基、NR3-(CHR3)n-芳基、(CHR3)n-NR3-芳基、(CHR3)n-NR3-烷基、(CHR3)n-NR3-環烷基、(CHR3)n-O-芳基、(CHR3)n-O-烷基、(CHR3)n-O-環烷基、O-(CHR3)n-芳基、S-(CHR3)n-芳基或CO-芳基，其中n為0、1或2，并且烷基、環烷基或芳基由以下基團任選取代，包括F、Cl、Br、I、CN、CO2H、CO2R3、NO2、CF3、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的環烷基、取代或未取代的芳基、OCF3、OR3、OSO2-芳基、取代或未取代的胺、NHCOR3、NHSO2R3、CONHR3或SO2NHR3；和R3為H或者取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的芳基。
由R1表示的優選基團包括-CH3、Br、 和
本發明的另一個目的是提供具有下式的抗血栓形成的嗎啉代基取代的喹諾酮衍生物 R和R2獨立為H、OH、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、芳基或(CH2)n-芳基；R1為H、OH、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、C3-C6環烷基、CH＝CH-芳基、C≡C-芳基、(CHR3)n-芳基、NR3-C1-C6烷基、NR3-環烷基、NR3-(CHR3)n-芳基、(CHR3)n-NR3-芳基、(CHR3)n-NR3-烷基、(CHR3)n-NR3-環烷基、(CHR3)n-O-芳基、(CHR3)n-O-烷基、(CHR3)n-O-環烷基、O-(CHR3)n-芳基、S-(CHR3)n-芳基或CO-芳基，其中n為0、1或2，并且烷基、環烷基或芳基由以下基團任選取代，包括F、Cl、Br、I、CN、CO2H、CO2R3、NO2、CF3、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的環烷基、取代或未取代的芳基、OCF3、OR3、OSO2-芳基、取代或未取代的胺、NHCOR3、NHSO2R3、CONHR3或SO2NHR3；和R3為H或者取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的芳基。由R1表示的優選基團包括-CH3、Br、 和
本發明的另一個目的是提供具有下式的抗血栓形成的嗎啉代基取代的苯并吡喃酮衍生物 R為H、OH、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、芳基或(CH2)n-芳基；R1和R2獨立為H、OH、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、C3-C6環烷基、CH＝CH-芳基、C≡C-芳基、(CHR3)-芳基、NR3-C1-C6烷基、NR3-環烷基、NR3-(CHR3)n-芳基、(CHR3)n-NR3-芳基、(CHR3)n-NR3-烷基、(CHR3)n-NR3-環烷基、(CHR3)n-O-芳基、(CHR3)n-O-烷基、(CHR3)n-O-環烷基、O-(CHR3)n-芳基、S-(CHR3)n-芳基或CO-芳基，其中n為0、1或2，并且烷基、環烷基或芳基由以下基團任選取代，包括F、Cl、Br、I、CN、CO2H、CO2R3、NO2、CF3、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的環烷基、取代或未取代的芳基、OCF3、OR3、OSO2-芳基、取代或未取代的胺、NHCOR3、NHSO2R3、CONHR3或SO2NHR3；和R3為H或者取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的芳基。
由R1表示的優選基團包括-CH3、Br、 和 嗎啉代基取代的吡啶并嘧啶衍生物的優選化合物顯示在表I中。
嗎啉代基取代的喹諾酮衍生物的優選化合物顯示在表II中。
嗎啉代基取代的苯并吡喃酮衍生物的優選化合物顯示在表III中。 本發明的另一個目的是提供用于抑制患者體內PI 3-激酶的方法，該方法包括給予所述患者一定量的本發明的化合物之一，其中所述用量在抑制患者體內磷酸肌醇3-激酶中是有效的。
本發明的另一個目的是提供通過給予需要的患者有效量的本發明化合物之一，用于預防或治療以下心血管疾病的方法，包括例如冠狀動脈閉塞、中風、急性冠狀動脈綜合征、急性心肌梗死、再狹窄、動脈粥樣硬化和不穩定性心絞痛。類似地，本發明期待通過給予需要的患者有效量的本發明化合物之一，預防或治療呼吸疾病，例如哮喘、慢性阻塞性肺疾病和支氣管炎，或者癌癥，例如神經膠質瘤、前列腺癌、小細胞肺癌和乳腺癌。
本發明的另一個目的涉及通過給予需要的患者有效量的本發明化合物之一，預防或治療與不正常的白細胞功能有關的疾病，例如自身免疫疾病和炎性疾病的方法。
在本發明的預防或治療疾病的方法中，最好以劑量形式給予有效量的本發明化合物之一。在優選的實施方案中，所述劑量優選以片劑(例如配制用于口服、舌下和口含給藥的片劑)、膠囊劑(例如包含粉末、液體或控釋制劑的膠囊劑)、靜脈制劑、鼻內制劑、肌注制劑、糖漿劑、栓劑、氣溶膠、口含制劑、經皮制劑或陰道栓劑的形式存在。所述劑量優選包含約5至約500mg的化合物，且更優選包含約25至約300mg的化合物。
附圖的簡述

圖1顯示在流動型的重組試驗(flow-based reconstitution assay)中多種濃度的TGX-40對血小板粘附于vWf包被的微量載玻片(microslides)的影響的線條圖；圖2顯示在全血流動試驗中多種濃度的TGX-40對血小板粘附于vWf包被的微量載玻片的影響的照片和線條圖；圖3顯示說明在動脈閉塞的動物模型中兩種濃度的TGX-40對產生規則的循環流量減少(CFRs)的大鼠血液流量的穩定性的影響的線條圖；和圖4顯示說明在全血流動試驗中多種濃度的TGX-84對血小板血栓形成的影響的線條圖。
優選方案的詳細描述在本說明書中，術語“烷基”指的是直鏈或支鏈的飽和脂肪烴基團。烷基優選具有1-6個碳并且由一個或更多個選自以下的基團任選取代，包括鹵素例如F、Cl、Br或I、CN、CO2R3、NO2、CF3、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C3-C6環烷基、取代或未取代的芳基、OCF3、OR3、取代或未取代的胺、NHCOR2、NHSO2R3、CONHR3或SO2NHR3，其中R3為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的芳基。
術語“環烷基”指的是非雜環(即碳環)或雜環。在這方面，非雜環的實例為取代或未取代的環丙烷、環丁烷、環戊烷、環己烷、環己二酮、環戊二酮、醌等。適宜的雜環烷基包括取代或未取代的吡咯烷、哌啶、哌嗪、2-哌啶酮、氮雜環己烷-2-酮和嗎啉基。環烷基在一個或更多個位置上由以下的基團任選取代，包括鹵素例如F、Cl、Br或I、CN、CO2R3、NO2、CF3、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C3-C6環烷基、取代或未取代的芳基、OCF3、OR3、取代或未取代的胺、NHCOR3、NHSO2R3、CONHR3或SO2NHR3，其中R3為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的芳基。
術語“芳基”指的是芳族或雜芳族環。芳基的實例為吡咯烷、噻吩、吡咯、吡唑、咪唑、1，2，3-三唑、1，2，4-三唑、噁唑、異噁唑、噻唑、異噻唑、呋喃、1，2，3-噁二唑、1，2，4-噁二唑、1，2，5-噁二唑、1，3，4-噁二唑、1，2，3，4-噁三唑、1，2，3，5-噁三唑、1，2，3-噻二唑、1，2，4-噻二唑、1，2，5-噻二唑、1，3，4-噻二唑、1，2，3，4-噻三唑、1，2，3，5-噻三唑、四唑、苯、吡啶、噠嗪、嘧啶、吡嗪、三嗪、茚、萘、吲哚、異吲哚、中氮茚、苯并呋喃、苯并噻吩、吲唑、苯并咪唑、苯并噻唑、嘌呤、喹嗪、喹啉、異喹啉、噌啉、2，3-二氮雜萘、喹唑啉、喹喔啉、二氮萘、蝶啶、芴、咔唑、咔啉、吖啶、吩嗪和蒽。芳基在一個或更多個位置上由以下的基團任選取代，包括鹵素例如F、Cl、Br或I、CN、CO2R3、NO2、CF3、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的C3-C6環烷基、取代或未取代的芳基、OCF3、OR3、取代或未取代的胺、NHCOR3、NHSO2R3、CONHR3或SO2NHR3，其中R2為H、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的芳基。
已發現本發明的嗎啉代基取代的化合物抑制脂質信號酶PI 3-激酶，該酶調節在血液流動條件下的血小板-粘附過程，因此呈現抗血栓形成活性，以及以下詳述的其它的藥理學性質。PI 3-激酶生成3-磷酸化的PI第二信使，包括磷脂酰肌醇-3-磷酸(PI(3)P)、磷脂酰肌醇-3，4-二磷酸(PI(3，4)P2)和磷脂酰肌醇-3，4，5-三磷酸(PI(3，4，5)P3)。這些第二信使被認為調節不同范圍的細胞現象，包括葡萄糖轉運、細胞凋亡的預防、囊泡運輸、細胞生長和細胞骨架再組織。
就本發明人所知，關于PI 3-激酶抑制劑對在病理生理相關的流動條件下血小板粘附的影響未見公開報道。此外，已發現PI 3-激酶在調節血小板粘附，尤其在生理流動條件下調節血小板粘附當中起至關重要的作用。因此，用本發明的化合物處理血小板可抑制PI 3-激酶的磷酸化脂質產物PI(3)P、PI(3，4)P2和PI(3，4，5)P3的形成，在流動條件下引起粘附于vWf基質的血小板的明顯減少。血小板粘附中的這種減少與異常血小板擴散和血栓形成有關。因為剪切-依賴性的血小板粘附和激活在動脈血栓形成中是重要的，PI 3-激酶對于常見的心血管疾病治療干涉是重要的目標。
PI 3-激酶的這些抑制劑也在多種其它的疾病狀態中具有潛在的治療用途。例如，PI 3-激酶在促進血管樹中即血管平滑肌細胞(Thyberg，1998，European Journal of Cell Biology 76(1)33-42)和肺中(氣道平滑肌細胞)的平滑肌增生中起重要作用。Krymskaya等，1999，AmericanJournal of Physiology 27765-78。血管平滑肌細胞的過量增殖在動脈粥樣硬化斑的形成和在侵入血管過程后的新內膜增生的發展中起重要作用。Scwartz等，1984，Progress in Cardiovascular Disease 26355-372；Clowes等，1978，Laboratory Investigations 39141-150。另外，氣道平滑肌細胞的過量增殖導致在哮喘和慢性支氣管炎開始時COPD的形成。因此，PI 3-激酶抑制劑可用于預防血管再狹窄、動脈粥樣硬化和COPD。
PI 3-激酶也在調節腫瘤細胞和在這些細胞經歷細胞凋亡生長的傾向中起重要作用。Sellers等，1999，The Journal of ClinicalInvestigation 1041655-1661。另外，PI 3-激酶的脂質產物PI(3，4，5)P3和PI(3，4)P2通過脂質磷酸酶PTEN的未控制調節在人體多種惡性腫瘤的發展中起重要作用。Leevers等，1999，Current Opinion in CellBiology 11219-225。因此，PI 3-激酶抑制劑可用于治療人體腫瘤。
PI 3-激酶在白細胞功能(Fuller等，1999，The Journal ofImmunology 162(11)6337-6340；Eder等，1998，The Journal ofBiological Chemistry 273(43)28025-31)和淋巴細胞功能(Vicente-Manzanares等，1999，The Journal of Immunology 163(7)4001-4012)中也起重要作用。例如，粘附于發炎的內皮的白細胞涉及通過PI 3-激酶依賴性的信號過程激活內源性白細胞整聯蛋白。另外，嗜中性粒細胞中的氧化爆發(Nishioka等，1998，FEBS Letters 441(1)63-66)和細胞骨架再組織(Kirsch等，1999，Proceedings National Academy ofSciences 96(11)6211-6216)似乎涉及PI 3-激酶的信號。因此，PI 3-激酶抑制劑可用于減少白細胞粘附和炎癥部位的激活，因此可用于治療急性和/或慢性炎性疾病。PI 3-激酶也在淋巴細胞增殖和激活中起重要作用。Fruman等，1999，Science 283(5400)393-397。已知淋巴細胞在自身免疫疾病中的重要作用，PI 3-激酶抑制劑可用于治療這類疾病。
通過參照以下實施例(提出這些實施例僅為了說明)，進一步介紹本發明。在這些實施例中不應有任何內容構成對本發明整個范圍的限制。實施例1嗎啉代基取代的吡啶并嘧啶衍生物的制備使用在本實施例中闡明的常見的合成流程，僅在起始的2-氨基吡啶上不同，可制備本發明的嗎啉代基取代的吡啶并嘧啶化合物。具體地講，用丙二酸二乙酯處理合適取代的2-氨基吡啶，得到羥基取代的吡啶并嘧啶。隨后使羥基取代的吡啶并嘧啶與磷酰氯反應，得到氯代吡啶并嘧啶。最后，氯代吡啶并嘧啶與嗎啉反應，得到嗎啉代基取代的吡啶并嘧啶。
按照以下通用的合成流程，可制備本發明的嗎啉代基取代的吡啶并嘧啶衍生物 2.R＝H，R1＝CH3(TGX-25-A)3.R＝H，R1＝Ph(TGX-37-A)4.R＝CH3，R1＝Ph(TGX-41-A)5.R＝H，R1＝芐基(TGX-40-A)起始的取代2-氨基吡啶(化合物1)對TGX-25(化合物2)為2-氨基-3-甲基吡啶，對TGX-37(化合物3)為2-氨基-3-苯基吡啶，對TGX-41(化合物4)為2-氨基-3-苯基-5-甲基吡啶，以及對TGX-40(化合物5)為2-氨基-3-芐基吡啶。
如下制備2-氨基-3-苯基吡啶將3-苯基吡啶(300mg，2mmol)溶于對-二甲苯(6ml)中，然后加入氨基鈉(84mg，2.1mmol)。將反應混合物加熱至回流溫度8小時。使反應混合物冷卻，傾入到冰/水(25ml)中，用二氯甲烷提取。用水和鹽水洗滌有機提取物，經無水硫酸鈉干燥。經過濾除去硫酸鈉，把濾液蒸發至干，并由乙醚和石油醚的混合液重結晶，得到2-氨基-5-苯基吡啶(95mg)。將重結晶母液蒸發至干，經柱層析法(硅膠)純化，從而用溶劑乙酸乙酯∶石油醚(30∶70)洗脫。得到為細黃色粉末的要求的產物2-氨基-3-苯基吡啶(15mg)。
如下制備2-氨基-3-苯基-5-甲基吡啶將2-氨基-5-甲基吡啶(10.8g，0.1M)溶于冰乙酸(200ml)中，并且加入N-溴代琥珀酰亞胺(20g，0.11M)。在室溫下，將反應混合物攪拌17小時。把反應混合物傾入到冰/水中，經過濾除去固體。用固體氫氧化鈉堿化濾液，經過濾分離生成的沉淀(12.8g)。于氮氣氛下，將產物2-氨基-3-溴代-5-甲基吡啶(3.7g，20mmol)溶于無水DMSO(100ml)中。加入苯基硼酸(2.66g，22mmol)，隨后加入碳酸鉀(9.66g，70mmol)和氯化雙(三苯基膦)-合鈀(II)(426mg，0.6mmol)。伴隨攪拌下，將反應混合物加熱至80℃15小時。使反應液冷卻，傾入到冰/水中，經過濾收集粗品產物。用1M鹽酸水溶液(200ml)處理所得的物質，攪拌10分鐘，過濾除去不溶的殘余物。用固體氫氧化鈉堿化濾液，過濾得到的黃色沉淀，干燥，得到為淺黃色固體的產物2-氨基-3-苯基-5-甲基吡啶(2.25g)。
如在Kelly等，1990，The Journal ofthe American Chemical Society1128024(1990)中描述的那樣由3-芐基吡啶制備2-氨基-3-芐基吡啶。
如下制備TGX-40于190-200℃，用丙二酸二乙酯(12g)處理2-氨基-3-芐基吡啶(5.4g)40分鐘。在相同溫度下用氮氣流蒸發過量的丙二酸二乙酯。用乙醚將所得到的固體研磨3次，真空干燥(2.4g，28％)。然后用過量的POCl3(6ml)處理羥基嘧啶衍生物(528mg)并且回流45分鐘。將反應混合物降至室溫并傾入到冰上。過濾得到的沉淀，干燥(341mg，59％)。將粗品氯代衍生物(191mg)溶于包含嗎啉(ml)的乙醇(10ml)中并回流4小時。將反應混合物降至室溫，真空濃縮。用碳酸氫鹽水溶液處理殘余物，過濾生成的沉淀，干燥(151mg，78％)。如下制備TGX-101 在回流溫度下，于氮氣氛中將溴代衍生物(化合物1)(324mg，1mmol)、4-氨基苯酚(化合物2)(110mg，1mmol)、叔丁醇鉀(225mg，2mmol)和PdCl2(dppf)(35mg，0.05mmol)在THF中的混合物攪拌20小時。使反應混合物冷卻，真空濃縮。用水稀釋得到的殘余物，得到深綠色沉淀，過濾，干燥。通過用乙醚(2次)和二氯甲烷(2次)連續研磨進一步純化該固體，得到要求的產物(化合物3)(140mg)。
TGX-101的1H NMR(300MHz，DMSO)δ9.37(s，1H，-OH)，7.96(s，1H)，7.79(s，1H，-NH)，7.13(d，J＝8.7Hz，2H)，6.80(d，J＝8.7Hz，2H)，6.66(d，J＝1.8Hz，1H)，5.58(s，1H)，3.65(br s，8H)，2.16(s，3H)。
通過以上方法，由溴代衍生物(化合物1)和4-氯苯胺制備TGX-107，通過使化合物1與4-氯芐胺偶合制備TGX-108，通過使化合物1與對-甲苯酚偶合制備TGX-109，通過使化合物1與4-吡啶基胺偶合制備TGX-112，通過使化合物1與4-氨基吡啶偶合制備TGX-120。以類似的方法，通過使化合物1與合適的取代胺偶合制備TGX-123和TGX-124和TGX-126和TGX-130。實施例28-取代2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮的制備按照以下顯示的通法，制備8-取代的2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮。簡言之，通過用三氟甲烷磺酸酐處理，使8-芐氧基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-131)脫芐基化，采用Evans等，1998，Tetrahedron Lett.392937-2940(實施例2A)的方法，使用芳基硼酸，通過銅促進的芳基化，或者使用芳基甲基鹵的堿催化烷基化(實施例2B)，使所得到的8-羥基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮衍生化。 實施例2A 2-嗎啉基-8-苯氧基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-141)8-羥基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮在氮氣氛下，滴加入三氟甲烷磺酸酐(1ml，6.0mmol)處理8-芐氧基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(0.97g，2.9mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液，并且在室溫下將該混合物攪拌過夜。加入甲醇(20ml)并把溶液攪拌另外1小時，然后使溶液蒸發至干。用乙酸乙酯溶解殘余物，用鹽水洗滌，干燥，然后通過硅膠柱使用0-5％在乙酸乙酯中的甲醇梯度洗脫。得到為棕色粉末的產物(0.35g)。2-嗎啉基-8-苯氧基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-141)將8-羥基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(0.2g，0.81mmol)、苯基硼酸(0.29g，2.4mmol)和乙酸銅(0.20g，1.6mmol)懸浮于二氯甲烷中并且用三乙胺(0.23ml，1.6mmol)處理，在室溫下將混合物攪拌4天。把產物吸附于硅膠上并通過硅膠柱用乙酸乙酯洗脫，得到淺褐色固體(0.026g)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ3.45(t，4H，J＝5Hz)，3.63(t，4H，J＝5Hz)，5.59(s，1H)，6.8(t，1H，J＝8Hz)，7.40(t，2H，J＝8.7Hz)，7.45-7.55(m，3H)，8.18(dd，1H，J＝9.0Hz，2Hz)。
以類似的方法但是使用合適的芳基硼酸也可制備8-(4-氟-3-甲基苯基)氧基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-168)和8-(2-甲基苯基)氧基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-182)實施例2B 8-(2-氯苯基)甲氧基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-177)將8-羥基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(59mg，0.24mmol)溶于乙腈(10ml)中，然后用無水碳酸鉀(197mg，1.4mmol)處理隨后用2-氯芐基溴(46mg，0.29mmol)處理，于80℃，將混合物攪拌過夜。冷卻后，將混合物直接吸附到硅膠上，然后通過硅膠柱用乙酸乙酯洗脫。得到為褐色固體的純化的產物(34mg)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ3.70(t，4H，J＝5Hz)，3.80(t，4H，J＝5Hz)，5.34(s，2H)，5.66(s，1H)，6.8(t，1H，J＝8Hz)，7.00(d，1H，J＝8Hz)，7.30(m，2H)，7.4(m，1H)，7.65(m，1H)，8.58(d，1H，J＝8Hz)。
以類似的方法但是使用合適的芳基甲基鹵也可制備8-(2-吡啶基甲基)氧基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-148)；8-(3-吡啶基甲基)氧基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-140)；8-(4-吡啶基甲基)氧基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-185)；8-(3-氯苯基)甲氧基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-176)；8-(4-溴苯基)甲氧基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-175)；8-(4-叔丁基苯基)甲氧基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-169)；和8-(3-甲氧基苯基)甲氧基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-163)。實施例2C 6-甲基-8-苯基氨基甲基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-183)按照以下流程合成TGX-183。在該合成程序中涉及的關鍵反應為鈀催化的乙烯化作用和一步裂解鏈烯官能團為醛基團。 試劑a).4-乙烯基吡啶，Cs2CO3，PdCl2(dppf)，DMF，80℃，16hrs，b).CTAP，CH2Cl2，2hrs，RT，c).i.NaBH4，甲醇，0.5hrs，RT，ii甲磺酰氯，Et3N，CH2Cl2，0℃然后苯胺，回流，4hrs。醛3的制備如下在氮氣氛下，于80℃，將溴代化合物1(324mg，1mmol)、4-乙烯基吡啶(0.5mL)、Cs2CO3(0.98g，3mmol)、PdCl2(dppf)(35mg)在DMF(10mL)中的混合物加熱16小時。將反應混合物降至室溫并且傾入到冰中。過濾生成的沉淀，真空干燥，無須進一步純化即可用于下一步的氧化反應。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.76(s，1H)，8.63(d，J＝4.73Hz，2H)，7.95(d，J＝16.63Hz，1H)，7.80(d，J＝1.98Hz，1H)，7.39(d，J＝6.10Hz，2H)，7.19(d，J＝16.48Hz，1H)，5.66(s，1H)，4.56(s，2H)，3.82(m，4H)，3.68(m，4H)，2.39(s，3H)。
將由以上反應得到的粗品產物2溶于二氯甲烷(30mL)中，向其中加入高錳酸十六烷基三甲基銨(Bhushan，V.等，Synthesis，431，1984)(0.5g)。在室溫下將反應混合物攪拌5小時。把反應混合物真空濃縮至其原來體積的一半，并且吸附到硅膠中。經短程柱層析法(硅膠，乙酸乙酯)分離為黃色固體的需要的產物3(158mg，58％)。1H NMR(300MHz，DMSO)δ10.7(s，1H)，8.84(s，1H)，8.11(s，1H)，5.67(s，1H)，3.66(br s，8H)，235(s，3H)。TGX-183(4)的制備如下在室溫下，將黃色的醛3(158mg)懸浮于甲醇(5mL)中并且與硼氫化鈉(20mg)反應。繼續攪拌直到反應液的顏色變為白色。把反應混合物真空濃縮并用水稀釋。過濾生成的白色沉淀，干燥，得到要求的產物(150mg)，無須進一步純化即可用于下一個合成步驟。1HNMR(300MHz，CDCl3)δ8.67(s，1H)，7.48(s，1H)，5.63(s，1H)，4.84(br s，2H)，3.80(m，4H)，3.60(m，4H)，2.34(s，3H)。
將先前反應得到的粗品產物(150mg)懸浮于二氯甲烷(10mL)中，向其中加入三乙胺(0.14mL，1mmol)隨后在冰冷的溫度下加入甲磺酰氯(0.078mL，1mmol)。15分鐘后，加入苯胺(0.18ml，2mmol)并且回流4小時。使反應混合物冷卻并用二氯甲烷(50ml)稀釋。用水、鹽水洗滌二氯甲烷層，經硫酸鈉干燥。真空蒸發溶劑后，經柱層析法(硅膠，乙酸乙酯)純化殘余物，得到純的苯胺衍生物4(TGX-183)(120mg)。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.65(s，1H)，7.52(s，1H)，7.18(m，2H)，6.74(br t，1H)，6.61(br d，2H)，5.64(s，1H)，4.56(s，2H)，3.79(m，4H)，3.63(m，4H)，2.28(s，3H)。TGX-1831H NMR(300MHz，DMSO)δ 8.52(s，1H)，7.52(s，1H)，7.06(d，J＝7.0Hz，1H)，7.03(d，J＝7.0Hz，1H)，6.55-6.50(m，3H)，6.20(t，J＝5.8Hz，1H，-NH)，5.62(s，1H)，4.44(d，J＝5.8Hz，2H)，3.66-3.59(m，8H)，2.23(s，3H)。按照對TGX-183(4)描述的方法，除在合成程序的最后步驟用4-氟-2-甲基苯胺替代苯胺，制備6-甲基-8-(2-甲基-4-氟代苯基)氨基甲基-2-嗎啉基-4H-吡啶并[1，2-a]嘧啶-4-酮(TGX-186)(5)。1H NMR(300MHz，DMSO)δ8.52(s，1H)，7.47(s，1H)，6.87(dd，J＝9.5，3.0Hz，1H)，6.72(m，1H)，6.23(dd，J＝9.0，4.9Hz，1H)，5.63(s，1H)，5.52(t，J＝5.8Hz，1H，-NH)，4.49(d，J＝6.1Hz，2H)，3.67-3.60(m，8H)，2.23(s，3H)，2.17(s，3H)。實施例3嗎啉代基取代的喹諾酮衍生物的制備按照以下通用合成流程，制備本發明的嗎啉代基取代的喹諾酮化合物 (4)R＝OC6H4(2-Me)(8)R＝OC8H4(2-Me)(5)R＝OC6H3(2-MeX4-F)(9)R＝OC6H3(2-Me)(4-F) (14)R＝Bn(TGX-57) (10)R＝Bn1(11)R＝OPh(15)R＝OPh(TGX-84)(12)R＝OC6H4(2-Me)(16)R＝OC6H4(2-Me)(TGX-115)(13)R＝OC6H3(2-Me)(4-F)(17)R＝OC6H3(2-Me)(4-F)(TGX-155)
通過采用Huang等，1989，Synthesis 317的方法，用合適取代的苯胺和Meldrum氏酸衍生物(化合物1)(Huang等，1986，Synthesis 967)起始，制備TGX-57(化合物14)、TGX-84(化合物15)、TGX-115(化合物16)和TGX-155(化合物17)。通過2-氯代硝基苯與鄰-甲苯酚或4-氟-鄰-甲苯酚反應，依次合成苯胺(化合物4)和(化合物5)，得到相應的硝基化合物，隨后經Pd催化氫化。
用2-芐基苯胺(化合物2)(或2-苯氧基苯胺，化合物3-5)代替Meldrum氏酸衍生物(化合物1)，得到中間體化合物6(或化合物7-9)，它與嗎啉反應后生成化合物10(或化合物11-13)。最后，通過使化合物10(或化合物11-13)在二苯基醚中回流15分鐘構成需要的喹啉酮骨架。
如下制備苯胺(化合物4和5)于80℃，將2-氯代硝基苯(5.68g，36mmol)、鄰-甲苯酚(或4-氟-鄰-甲苯酚)(40mmol)和碳酸鉀(14.9g，108mmol)在DMSO(120mL)中的混合物攪拌18小時。加入水(60mL)并且用乙酸乙酯(3×200mL)提取反應混合物。依次用1M氫氧化鈉(3×100mL)和氯化鈉的水溶液(100mL)洗滌合并的有機提取液，干燥(硫酸鈉)，減壓下蒸發，得到相應的硝基化合物(95-100％)。在環境溫度下，于乙醇中將硝基化合物Pd/C催化氫化7小時，得到需要的苯胺。過濾催化劑并且減壓下蒸發得到的濾液，得到為棕色油(90-95％)的苯胺(化合物4)(或化合物5)。粗品苯胺(化合物4-5)無須進一步純化即可用于隨后與Meldrum氏酸衍生物(化合物1)的反應。
如下制備5-[苯胺基(甲硫基)亞甲基]-2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷(化合物6-9)于140℃，將5-[雙(甲硫基)亞甲基]-2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷(化合物1)(2.48g，10mmol)、2-取代苯胺(化合物2)(或化合物3-5)(10mmol)在乙醇(25mL)中的混合物加熱4.5小時。減壓下蒸發溶劑，得到粗品黃色的油，使用石油醚/乙酸乙酯(9∶1然后3∶1)作為洗脫液，經快速層析法純化后，得到化合物6(或化合物7-9)(68-77％)。
5-[2-芐基苯胺基(甲硫基)亞甲基]-2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷(化合物6)的1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.73(6H，s，CH3)，1.89(3H，s，CH3)，4.04(2H，s，CH2)，7.08-7.41(9H，m，CHAr)。5-[甲硫基-(2-苯氧基苯胺基)亞甲基]-2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷(化合物7)的1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.62(6H，s，CH3)，2.20(3H，s，CH3)，6.90-7.72(9H，m，CHAr)。5-[2-(2’-甲基苯氧基)苯胺基(甲硫基)亞甲基]-2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷(化合物8)的1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.70(6H，s，CH3)，2.25(3H，s，CH3)，2.31(3H，s，CH3)，6.80-7.44(8H，m，CHAr)。5-[2-(4’-氟代-2’-甲基苯氧基)苯胺基(甲硫基)亞甲基]-2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷(化合物9)的1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.72(6H，s，CH3)，2.22(3H，s，CH3)，2.33(3H，s，CH3)，6.72-7.44(7H，m，CHAr)，7.8(1H，s，NH)。
如下制備5-[苯胺基(嗎啉代)亞甲基]-2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷(化合物10-13)于回流溫度下，將5-[苯胺基(甲硫基)亞甲基]-2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷(化合物6)(或化合物7-9)(18mmol)和嗎啉(3.15mL，36mmol)在四氫呋喃(100mL)中的混合物加熱過夜。蒸發溶劑并用乙醚洗滌粗品黃色固體，得到為白色固體的化合物10(或化合物11-13)(90-95％)。5-[2-芐基苯胺基(嗎啉代)亞甲基]-2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷(化合物10)的1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.04(6H，s，CH3)，3.39(4H，t，J4.9Hz，CH2)，3.70(4H，t，J4.9Hz，CH2)，6.55(1H，d，J7.5Hz，CHAr)，6.95(1H，td，J7.5，1.2Hz，CHAr)，7.08-7.23(7H，m，CHAr)。5-[嗎啉代-(2-苯氧基苯胺基)亞甲基]-2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷(化合物11)的1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.60(6H，s，CH3)，3.31(4H，t，J4.7Hz，CH2)，3.71(4H，t，J4.7Hz，CH2)，6.92-7.35(9H，m，CHAr)。5-[2-(2’-甲基苯氧基)苯胺基(嗎啉代)亞甲基]-2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷(化合物12)的1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.67(6H，s，CH3)，2.19(3H，s，CH3)，3.32(4H，t，J4.6Hz，CH2)，3.74(4H，t，J4.6Hz，CH2)，6.73(1H，dd，J8.0，1.5Hz，CHAr)，6.90(1H，dd，J8.0，1.5Hz，CHAr)，7.08-7.24(6H，m，CHAr)，9.51(1H，s，NH)。5-[2-(4’-氟代-2’-甲基苯氧基)苯胺基(嗎啉代)亞甲基]-2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷(化合物13)的1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.68(6H，s，CH3)，2.17(3H，s，CH3)，3.33(4H，t，J4.6Hz，CH2)，3.74(4H，t，J4.6Hz，CH2)，6.66(1H，dd，J8.0，1.2Hz，CHAr)，6.89-7.29(5H，m，CHAr)，7.41(1H，t，J8.0Hz，CHAr)，9.47(1H，s，NH)。
如下制備2-嗎啉代-4-喹諾酮(化合物14-17；TGX-57、TGX-84、TGX-115和TGX-155)于240℃下，在二苯基醚(3-4mL)中將5-[苯胺基(嗎啉代)亞甲基]-2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷(化合物10)(或化合物11-13)加熱15分鐘。使反應混合物冷卻至室溫并加入石油醚(bp 60-90℃，30mL)，得到粗品化合物，使用石油醚/乙酸乙酯(1∶1)，然后乙酸乙酯/甲醇(9∶1)作為洗脫液，經快速層析法純化后，得到化合物14(或化合物14-17)(40-50％)。8-芐基-2-嗎啉代-4-喹諾酮(化合物14；TGX-57)的1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.11(4H，t，J4.6Hz，CH2)，3.58(4H，t，J4.6Hz，CH2)，4.44(2H，s，CH2)，6.75(1H，s，CH)，7.21-7.33(6H，m，CHAr)，7.59(1H，d，J7.3Hz，CHAr)，7.78(1H，d，J7.3Hz，CHAr)。2-嗎啉代-8-苯氧基-4-喹諾酮(化合物15；TGX-84)的1H NMR(400MHz，CDCl3)δ3.30(4H，t，J5Hz，CH2)，3.82(4H，br.s，CH2)，5.80(1H，s，CH)，6.98(1H，d，J7.5Hz，CHAr)，7.09(2H，d，J8.0Hz，CHAr)，7.13(1H，t，J8.0Hz，CHAr)，7.20(1H，t，J7.5Hz，CHAr)，7.40(2H，t，J8.0Hz，CHAr)，7.98(1H，dd，J7.5，1.2Hz，CHAr)。8-(2’-甲基苯氧基)-2-嗎啉代-4-喹諾酮(化合物16；TGX 115)的1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.24(3H，s，CH3)，3.33(4H，t，J4.8Hz，CH2)，3.87(4H，t，J4.8Hz，CH2)，5.80(1H，s，CH)，7.01(1H，d，J8.1Hz，CHAr)，7.08(1H，t，J8.0Hz，CHAr)，7.16-7.29(3H，m，CHAr)，7.32(1H，d，J8.0Hz，CHAr)，7.92(1H，d，J8.0Hz，CHAr)，8.26(1H，s，NH)。8-(4’-氟代-2’-甲基苯氧基)-2-嗎啉代-4-喹諾酮(化合物17；TGX 155)的1H NMR(300MHz，CDCl3)δ2.20(3H，s，CH3)，3.35(4H，t，J4.8Hz，CH2)，3.88(4H，t，J4.8Hz，CH2)，5.80(1H，s，CH)，6.65(1H，d，J8.1Hz，CHAr)，6.95-7.10(4H，m，CHAr)，7.92(1H，d，J8.1Hz，CHAr)，8.23(1H，s，NH)。
如以上概述的，用合適的2-取代苯胺并且與Meldrum氏酸衍生物(化合物3)偶合，可制備TGX-99、TGX-106、TGX-111、TGX-113和TGX-121。實施例4.嗎啉代基取代的苯并吡喃酮衍生物的制備按照以下取自Morris等，1994，Synth.Commun，24849-858的經修改的通法，制備8-(取代)-2-(4-嗎啉基)-4H-1-苯并吡喃-4-酮。簡言之，乙酰基嗎啉的烯醇化鋰與取代的水楊酸酯(1)反應，得到中間體水楊酰乙酰胺(salicylacetamide)(2)。(2)采用三氟甲磺酸酐環化脫水，得到取代的嗎啉代基取代的苯并吡喃酮(3)。 將產物(3)的8-位的具體取代基引入到前體(1)(方法A)或加工成2-(4-嗎啉基)-8-三氟甲磺酰氧基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(3，R＝CF3SO3)(方法B和C)。方法A實施例A-1 2-嗎啉基-8-(苯基甲基)-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-90)3-(苯基甲基)水楊醛向溫熱的、攪拌的氫氧化鈉(8.0g)在水(8.0ml)中的混合物中加入溫熱的2-羥基二苯基甲烷(1)(4.9g，27mmol)的乙醇(4ml)溶液，并且把混合物加熱至65℃。將氯仿(4.1ml)向下加入到水冷凝器中并使生成的混合物開始回流。回流1小時后，在冰上冷卻混合物，用1N HCl酸化至pH2，用乙酸乙酯(3×30ml)提取。干燥(Na2SO4)合并的提取液，除去溶劑，得到深棕色的膠狀物。通過硅膠柱用0-10％在石油溶劑油中的乙酸乙酯洗脫產物，得到黃色的油(1.33g，24％)。3-(苯基甲基)水楊酸甲酯按照Sharma等，2000，Synth.Commun.，30397-405的通法，滴加入硝酸銀(2.0g，12mmol)的水(16ml)溶液處理攪拌著的3-(苯基甲基)水楊醛(1.27g，6mmol)的乙醇(16ml)溶液。然后于40分鐘內滴加入氫氧化鉀(2.69g，48mmol)溶液。于室溫把溶液攪拌6小時。通過硅藻土墊過濾混合物，用水(2×10ml)洗滌濾墊。用乙醚(2×15ml)洗滌濾液，然后用1N HCl酸化。用乙醚(2×30ml)提取乳狀懸浮液，干燥(Na2SO4)合并的提取液，除去溶劑，得到為褐色固體的3-(苯基甲基)水楊酸(0.47g，34％)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ4.02(s，2H)，6.84(t，1H，J＝8Hz)，7.19-7.32(m，6H)，7.79(d，1H，J＝8Hz)，10.74(s，1H)。
向所述酸(0.47g，2.1mmol)的干燥甲醇(40ml)溶液中加入濃硫酸(0.47g)并將該溶液加熱至回流96小時。冷卻后，除去甲醇，用水(50ml)溶解殘余物，并用二氯甲烷(3×20ml)提取。干燥(Na2SO4)合并的提取液，除去溶劑。通過硅膠柱用5％在石油溶劑油中的乙酸乙酯洗脫殘余物，得到無色的油(0.23g，46％)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ3.94(s，3H)，4.03(s，2H)，6.81(t，1H，J＝8Hz)，7.20-7.32(m，6H)，7.73(dd 1H，J＝8Hz，1.5Hz)，11.10(s，1H)。(4-嗎啉基)-3-[2’-羥基-3’-(苯基甲基)苯基]-3-氧代丙酰胺用在己烷中的正丁基鋰(1.6M，2.73ml，4.4mmol)處理二異丙胺(0.62ml，4.4mmol)的四氫呋喃(10ml)冷的溶液并于0℃把該溶液攪拌10分鐘。加入4-乙酰基嗎啉(0.25ml，2.2mmol)并繼續于0℃攪拌另外30分鐘。滴加入在四氫呋喃中的3-(苯基甲基)水楊酸甲酯(0.33g，1.4mmol)并使混合物達到室溫且繼續攪拌過夜。用1N HCl中和該溶液，用二氯甲烷(3×30ml)提取該混合物。干燥(Na2SO4)合并的提取液，除去溶劑。通過硅膠柱用0-10％在二氯甲烷中的甲醇洗脫殘余物，得到淺黃色的油(0.55g)，其包含殘留的4-乙酰基嗎啉。產物未經進一步純化即可如下反應。2-嗎啉基-8-(苯基甲基)-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-90)在氮氣氛下，向攪拌著的部分純化的(4-嗎啉基)-3-[2’-羥基-3’-(苯基甲基)苯基]-3-氧代丙酰胺(0.55g)的二氯甲烷的溶液中滴加入三氟甲磺酸酐，并且在室溫下把該溶液攪拌過夜。除去溶劑，以甲醇(10ml)溶解殘余物并繼續攪拌另外4小時。除去甲醇并且用半飽和的碳酸氫鈉溶液(30ml)處理殘余物，用二氯甲烷(3×20ml)提取。洗滌(飽和的NaCl)合并的提取液，干燥(Na2SO4)，除去溶劑，得到橙色固體，其自乙酸乙酯重結晶，得到淺桃紅色的細針晶(0.12g，27％自3)。1HNMR(CDCl3，300MHz)δ3.32(t，3H)，3.69(t，3H)，4.19(s，2H)，5.47(s，1H)，7.13(d，1H，J＝8Hz)，7.20-7.40(m，6H)，8.08(dd，1H，J＝8Hz，1.8Hz)。
實施例A-2 2-(4-嗎啉基)-8-苯氧基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-134)2，3-二羥基苯甲酸甲酯滴加濃硫酸(4.2g)處理2，3-二羥基苯甲酸(3.8g，24.6mmol)在甲醇(300ml)中的混合物并且于回流溫度下將生成的溶液加熱過夜。冷卻后蒸發溶劑，將殘余物傾入到冰-水中。用二氯甲烷(3×50ml)提取混合物，干燥(Na2SO4)合并的有機部分，濃縮，得到淺褐色固體(4.05g)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.92(s，3H)，6.76(t，1H，J＝7.6Hz)，7.08(d，1H，J＝7.2Hz)，7.33(d，1H，J＝7.6Hz)，10.88(s，1H)。3-苯氧基-2-羥基苯甲酸甲酯向懸浮于二氯甲烷(100ml)中的2，3-二羥基苯甲酸甲酯(1.50g，8.9mmol)、苯基硼酸(1.08g，8.9mmol)和乙酸銅(1.62g，8.9mmol)的混合物中加入三乙胺(6.15ml，44.5mmol)，并且于室溫下將混合物攪拌96小時。除去溶劑，并且產物通過硅膠柱層析，用0-10％在二氯甲烷中的甲醇梯度洗脫。得到淺黃色油的產物(0.25g)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ3.97(s，3H)，6.86(t，1H，J＝8Hz)，6.9-7.4(m，6H)，7.67(dd，1H，J＝8Hz，2Hz)，10.94(s，1H)。2-(4-嗎啉基)-8-苯氧基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-134)使N-乙酰基嗎啉的烯醇化鋰(0.21g，1.6mmol)與3-苯氧基-2-羥基苯甲酸甲酯(0.25g，1.0mmol)縮合，隨后如上描述的，用三氟甲磺酸酐(0.60ml，3.6mmol)環化脫水，得到為灰白色固體的TGX-134(0.090g)。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ3.22(t，4H，6Hz)，3.63(t，4H，6Hz)，5.46(s，1H)，6.97(d，2H，J＝9Hz)，7.09(t，1H，J＝8Hz)，7.2-7.4(m，4H)，7.94(dd，1H，J＝6Hz，4Hz)。
實施例A-3 2-(4-嗎啉基)-8-三氟甲磺酰氧基-4H-1-苯并吡喃-4-酮2-羥基-3-三氟甲磺酰氧基-苯甲酸甲酯向溶于二氯甲烷(50mL)中的2，3-二羥基苯甲酸甲酯(2.1g，12.5mmol)中加入吡啶(2.0ml，25mmol)和二甲基氨基吡啶(150mg，1.25mmol)。將混合物冷卻至0℃并且通過注射器滴加入三氟甲磺酸酐。撤除冰浴并在室溫下攪拌60小時。用1M HCl(20ml)把有機層洗滌2次，干燥(Na2SO4)，真空濃縮至干。自乙酸乙酯重結晶該固體，得到無色結晶(2.5g)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ3.99(s，3H)，6.93(t，1H，J＝8.1Hz)，7.43(d，1H，J＝8.4Hz)，7.86(d，1H，J＝8.1Hz)，11.2(s，1H)。2-(4-嗎啉基)-8-三氟甲磺酰氧基-4H-1-苯并吡喃-4-酮使N-乙酰基嗎啉的烯醇化鋰(2.2ml)與2-羥基-3-三氟甲磺酰氧基-苯甲酸甲酯(3.56g，11.9mmol)縮合，得到水楊酰乙酰胺(3.6g)。如以上描述的，產物用三氟甲磺酸酐(5.5ml)環化脫水得到為無色固體的產物(1.21g)。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ3.57(bs，4H)，3.84(bs，4H)，5.52(s，1H)，7.38(t，1H，J＝6.8Hz)，7.48(d，1H，J＝8.0Hz)，8.15(d，1H，J＝8.0Hz)。方法B實施例1-B 2-(4-嗎啉基)-8-(4-氟-2-甲基苯基)氧基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-184) 2-(4-嗎啉基)-8-羥基-4H-1-苯并吡喃-4-酮向三氟甲磺酸酯(0.53g，1.4mmol)的THF(25ml)溶液中加入叔丁醇鈉(0.203g，2.1mmol)，并于室溫下，將混合物攪拌過夜。除去溶劑，殘余物通過硅膠柱直接層析，用0-10％在二氯甲烷中的甲醇洗脫，得到白色固體(0.19g)。
1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δ3.49(s，4H)，3.69(s，4H)，5.45(s，1H)，7.10(d，2H，J＝6.8Hz)，7.31(s，1H)，10.14(s，1H)。2-(4-嗎啉基)-8-(4-氟-2-甲基苯基)氧基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-184)向2-(4-嗎啉基)-8-羥基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(77mg，0.31mmol)、4-氟-2-甲基苯基硼酸(48mg，0.31mmol)和乙酸銅(57mg，0.31mmol)懸浮于二氯甲烷(3.1ml)中的混合物中加入三乙胺(216μL，1.56mmol)，并于室溫下，將混合物攪拌24小時。除去溶劑，產物通過硅膠柱用0-10％在二氯甲烷中的甲醇洗脫，得到灰白色固體(37mg)。
1H NMR(d6-DMSO，300MHz)δ2.27(s，3H)，3.38(t，4H，5Hz)，3.74(t，4H，5Hz)，5.51(s，1H)，6.7-6.9(m，2H)，7.01(m，2H)，7.22(t，1H，J＝9Hz)，8.55(dd，1H，J＝9Hz，2Hz)。
以類似的方法也可合成8-苯氧基-2-嗎啉基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-134)；8-(2-甲基苯基)氧基-2-嗎啉基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-182)；和8-(4-氟-3-甲基苯基)氧基-2-嗎啉基-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-173)。方法C實施例C-1 2-嗎啉基-8-(4-氟代苯基)-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-165) 向于氮氣氛下鼓泡的三氟甲磺酸酯(0.20g，0.52mmol)、碳酸鉀(0.182g，1.38mmol)的乙腈(10ml)溶液中加入4-氟代苯基硼酸(0.089g，0.63mmol)，隨后加入乙酸鈀(0.012g，0.05mmol)，并于氮氣氛下，將該溶液加熱24小時。冷卻后過濾混合物并用乙腈(10ml)洗滌濾餅。合并濾液和洗滌液，除去溶劑，得到黃色固體，將其通過硅膠柱用乙酸乙酯洗脫，得到無色固體(0.057g)。1H NMR(CDCl3，300MHz)δ3.33(t，4H，J＝5.3Hz)，3.74(t，4H，J＝5.3Hz)，5.52(s，1H)，7.16(t，1H，J＝10Hz)，7.40(t，2H，J＝8.7Hz)，7.45-7.55(m，3H)，8.18(dd，1H，J＝9.0Hz，2Hz)。
以這種方法，但是使用合適的芳基硼酸和三氟甲磺酸酯制備以下化合物
2-嗎啉基-8-(2-甲基苯基)-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-145)；2-嗎啉基-8-(2-三氟甲基苯基)-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-135)；2-嗎啉基-8-(2-氯苯基)-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-146)；和2-嗎啉基-8-(4-苯氧基苯基)-4H-1-苯并吡喃-4-酮(TGX-166)。實施例5.體外PI 3-激酶試驗使用體外PI 3-激酶試驗，測定TGX-25、TGX-33、TGX-37、TGX-40、TGX-41、TGX-57、TGX-84、TGX-90、TGX-93、TGX-98、TGX-99、TGX-101、TGX-106、TGX-107、TGX-108、TGX-109、TGX-111、TGX-112、TGX-113、TGX-115、TGX-120、TGX-121、TGX-123、TGX-124、TGX-126、TGX-127、TGX-130或TGX-131對PI 3-激酶活性的影響。使用自人血小板作為酶和PI作為底物免疫沉淀的PI 3-激酶進行該試驗。如先前描述的(Susa等，1992，The Journalof Biological Chemistry 267(32)22951-22956)，通過測量酶促[32P]摻入到PI中形成PI([32P]-3)P，將PI 3-激酶活性定量。
將洗滌后的人血小板在Triton X-100裂解緩沖液(10mM Tris，pH7.4，1％Triton X-100，2mM EDTA，1mM PMSF)中裂解30分鐘。通過于15,000g下使細胞裂解物離心10分鐘，除去Triton X-100不溶的部分。于4℃，通過使500μg的細胞裂解物與1μg的抑制PI 3-激酶的p85/110形式的兔抗大鼠抗體和30μl的50％蛋白A-瓊脂糖珠混合2小時，將PI 3-激酶免疫沉淀。通過于15,000g下離心5秒，使這些珠沉淀，分離蛋白A-瓊脂糖結合的PI 3-激酶，用冰冷卻的TritonX-100裂解緩沖液洗滌3次，隨后用PI 3-激酶測試緩沖液(20mMHEPES，pH7.4，1mM EGTA，5mM MgCl2)洗滌4次。
于N2氛下，將保存在CHCl3中的PI干燥，以330μg/ml的最后的濃度再懸浮于脂質緩沖液(50mM HEPES，pH7.2，1mM EDTA)中，并且于冰上超聲處理6分鐘。通過使免疫沉淀的PI 3-激酶與40μ1的PI、10μl的ATP(1mM)和32p-r-ATP(0.5μCi，1μCi/nmol)、10μl的10x激酶緩沖液混合20分鐘，用水調至最后的測試體積100μl，生成PI([32P]-3)P。加入ATP之前，將TGX-25、TGX-33、TGX-37、TGX-40、TGX-41、TGX-57、TGX-84、TGX-90、TGX-93、TGX-98、TGX-99、TGX-101、TGX-106、TGX-107、TGX-108、TGX-109、TGX-111、TGX-112、TGX-113、TGX-115、TGX-120、TGX-121、TGX-123、TGX-124、TGX-126、TGX-127、TGX-130或TGX-131與PI 3-激酶一起預先孵育5分鐘。用100μl的1N HCl終止試驗，并且用200μl氯仿∶甲醇(1∶1)和500μl的2M KCl提取PI([32P]-3)P產物。使用包含CHCl3∶MeOH∶HAC∶H2O(43∶38∶5∶7)(v∶v∶v∶v)的溶劑體系，通過薄層層析法解析氯仿相中的PI([32P]-3)P，并經放射自顯影術顯示。然后自TLC板刮下PI([32P]-3)P斑點，于53℃，用1ml的甲胺∶丁醇∶甲醇(42∶9∶47)(v∶v∶v)脫酰基化4小時，使用液體閃爍計數器(LKB 1209 RackBETA)定量。
每一種受試化合物的抑制濃度(μM)列于以下表IV中。
表IV化合物 IC50(μM)TGX-25 -11.1TGX-37 -10.5TGX-40 -1.5TGX-41 -9.8TGX-57 2TGX-84 0.1TGX-90 0.1TGX-93 1TGX-98 1TGX-99 1TGX-101 0.1TGX-102 0.1TGX-106 2TGX-107 1.0TGX-108 1TGX-109 1TGX-111 0.05TGX-112 0.5TGX-113 0.5TGX-115 0.05
表IV化合物 IC50(μM)TGX-11810.0TGX-1201.0TGX-1210.05TGX-1230.2TGX-1241.0TGX-12525TGX-1260.05TGX-1270.05TGX-1300.2TGX-1310.5TGX-1321.0TGX-1335.0TGX-1340.1TGX-1350.2TGX-1370.05TGX-1381.0TGX-1391.0TGX-14010.0TGX-1411.0TGX-1422.0TGX-1430.15TGX-1442.0TGX-1452.0TGX-1460.5TGX-1475.0TGX-14810.0TGX-1490.5TGX-1510.5TGX-1520.5TGX-15320.0TGX-15410.0TGX-1550.02TGX-1565.0TGX-1575.0TGX-1585.0TGX-15910.0TGX-1602.0TGX-1610.5TGX-1622.0TGX-1631.0TGX-1651.0TGX-1670.05TGX-1680.75TGX-1697.5TGX-1700.2TGX-1730.1
表IV化合物 IC50(μM)TGX-1740.1TGX-1760.5TGX-17910.0TGX-1801.0TGX-1860.01實施例6.流動型的重組試驗使用流動型的粘附試驗，檢測TGX-40對血小板粘附的作用。用紅細胞重組成為50％的血細胞比容之前，于37℃，用10、25或50μM的TGX-40或者對照緩沖液(0.1％DMSO)預先處理洗滌后的血小板30分鐘。以1800s-1的剪切速度，通過vWf包被的微量載玻片使所述血小板和重組的紅細胞灌注1分鐘。通過以1800s-1洗滌10分鐘，除去未粘附的細胞，并且將粘附的血小板的數目定量且以平均值±SEM表示。如在圖1中作圖闡明的，當用10、25和50μM的TGX-40預先處理血小板時，以劑量依賴方式TGX-40抑制血小板粘附的能力顯示血小板粘附減少51、67和86％。實施例7.全血流動的試驗使用全血流動的試驗，檢測TGX-40對血小板血栓形成的抑制作用，因為由洗滌后的血小板形成的血栓是小的和難再現的。伴隨輕輕振搖，用50、100或200μM的TGX-40或對照緩沖液(0.1％DMSO)孵育抗凝全血30分鐘，然后以1800s-1的剪切速度，通過vWf包被的微量載玻片灌注2分鐘。通過以1800s-1洗滌10分鐘，除去未粘附的血小板，并且用1％草酸銨裂解粘附的紅細胞。經通過分光光度法測量在全細胞裂解物中血小板LDH(U/L)水平，間接定量血栓形成的水平。灌注全血2分鐘后，通過微量載玻片的表面觀察富血小板的血栓。如在圖2的照片中所看到的，用TGX-40預先處理以劑量依賴方式抑制血小板血栓在vWf基質上形成的能力。如在圖2中作圖闡明的，用50、100和200μM的TGX-40預先處理全血導致相對于對照組血栓形成減少25、53和80％。實施例8.體內頸總動脈閉塞的動物模型在良好建立的Folts等，1982，Circulation 65248-255的動脈血栓動物模型上檢測TGX-40的抑制作用。該模型用于研究抗血栓形成藥對于碾壓損傷后動脈狹窄反應的體內凝固時間的影響。
將麻醉大鼠的頸總動脈解剖出來，把電磁流量探測器放置在動脈周圍以測量血流量。鄰近該流量探測器，用覆蓋硅酮管的手術鉗夾住動脈以引起對血管壁內膜和中層的損傷。將合適內徑的結扎或塑料柱體放置到動脈周圍以使動脈直徑減少70％。
血小板聚集在狹窄和損傷的動脈血管的區域，逐漸形成閉塞性血小板血栓，正如所觀察到血流量的減少。當血栓形成時，血壓升高，引起血栓成為碎片并栓塞狹窄部位的末稍。如果血栓不能自發地栓塞，輕輕地振動狹窄的區域以取出血栓。這引起血流量的突然恢復。血小板再次聚集在狹窄和損傷的動脈血管的區域，重復血栓栓塞模式。急性血小板介導的血栓形成接著栓塞在血液流動中引起周期性流量減少(CFR)。一旦大鼠產生有規則的CFRs，通過頸靜脈給予抗血栓形成化合物或媒介物對照。
在1.6mg/kg和3.2mg/kg的劑量下，通過頸靜脈給予TGX-40并且記錄血流量的穩定性。如在圖3中作圖闡明的，在1.6mg/kg和3.2mg/kg下，TGX-40于10分鐘內使90％的治療組動物恢復為基線，表明該化合物具有治療冠狀動脈閉塞的用途。實施例9.TGX-84對流動下血小板血栓形成的作用于37℃，用50、100或200μM的TGX-84或對照緩沖液(0.1％DMSO)將含枸櫞酸鹽的全血預先處理10分鐘。以600s-1，通過馮維勒布蘭德因子-(vWf)包被的毛細管灌注血液2分鐘。通過以600s-1灌注緩沖液2分鐘，除去未粘附細胞，并且通過用1％草酸銨處理，使任何粘附的紅細胞裂解。然后通過加入1％的TritonX-100裂解粘附的血小板并經分光光度法分析乳酸脫氫酶(LDH)水平(U/L)。在圖4中作圖顯示結果。如在圖4中闡明的，用50、100、200μM的TGX-84預先處理全血導致相對于對照組的血栓形成減少。實施例10.體外酶試驗PI3K和PI4K進行體外酶試驗作為初步篩選以測定候選藥物的同種型親和性和特異性。也可測定喹諾酮系列的兩個先導化合物(TGX84和TGX155)對密切相關的酶家族PI4K的親和性以使化合物的特異性最大化，因此使潛在的不利的生化反應最小化。
使用識別對于所述酶的兩種形式為相同的p85調節亞單位的抗體，使PI3K的α和β同種型自血小板裂解物中免疫沉淀。在Thrombogenix實驗室中γ同種型作為重組蛋白產生。以類似的方法，使用PI4K特異性抗體由血小板中分離PI4K。在抑制劑存在或不存在下，使用采用磷脂酰肌醇和32P的標準磷酸化試驗以便測量所述免疫沉淀中的酶活性。在多種抑制劑的濃度下測定酶活性以便確定IC50值。
LY294002對于PI3K的α/β同種型的IC50與先前報道的值(1-1.5μM)相一致。
表VLY294002和Thrombogenix化合物對PI3Kα/β同種型的親和性化合物 化學類型PI3Kα/βIC50(μM) PI3Kγ(μM)LY294002 - 1-1.5 2TGX-155 QU 0.02 5TGX-127 QU 0.05 5-10TGX-115 QU 0.05 5TGX-167 PP 0.05 5-10TGX-137 PP 0.05 5TGX-126 PP 0.05 ＞10TGX-183 PP 0.05TGX-184 BP 0.05TGX-121 QU 0.05 5TGX-111 QU 0.05 ＞10TGX-84QU 0.1 5TGX-101 PP 0.1 2TGX-174 PP 0.1 5TGX-134 BP 0.1 0.2TGX-102 BP 0.1 2TGX-90BP 0.1 3TGX-143 QU 0.15 2TGX-173 BP 0.15QU-喹諾酮系列；PP-吡啶并嘧啶系列；BP-苯并吡喃酮系列與它對PI3K的高效親和性相反，TGX155和TGX84對PI4K呈現100μM的IC50。實施例11酶篩選試驗篩選喹諾酮系列的兩個先導化合物TGX155和TGX84抑制在功能或底物特異性上與PI3K有關的以下7種酶的活性，即ATP酶、PDE4、酪氨酸激酶EGF和fyn、蛋白激酶A和C以及酪氨酸磷酸酶。TGX155和TGX84對每一種酶的抑制作用的IC50值大于100μM，證實了化合物的目標特異性。實施例12細胞增殖試驗使用K562(白血病衍化)和U937(moncytic)細胞系，測定來自所有三個化學類型的本發明的化合物的抗增殖活性。通過使用代謝活性比色試驗，計算細胞數目并測定細胞生存力，于4天內監測化合物的細胞毒活性。
TGX化合物的抗增殖活性(20μM，4天孵育)化合物 ％剩余細胞TGX-168 15TGX-123 10TGX-167 1.5TGX-186 1.5TGX-40 75這些數據證實所述化合物可用于防止細胞增殖。因此，本發明的化合物可用于治療癌癥和其它的疾病，例如其中涉及異常細胞增殖的哮喘。實施例13.制備和給予包含嗎啉代基取代的化合物的藥用組合物本發明另一方面涉及包含與一種或更多種藥學上可接受的載體和/或稀釋劑一起的本發明的嗎啉代基取代的化合物的藥用組合物。以下術語“活性成分”可為任何本發明的嗎啉代基取代的化合物，或其生理上可接受的鹽、溶劑合物或官能衍生物。
通過任何便利的方法給予該藥用組合物。例如通過口服、靜脈、腹膜內、肌內、皮下、皮內或栓劑途徑、或通過植入(例如使用緩慢釋放的分子)，可每天、每周、每月或以其它適宜的時間間隔給予不同劑量。如果活性化合物以片劑形式給予，則片劑包含粘合劑例如黃蓍膠、玉米淀粉或明膠，崩解劑例如藻酸，以及潤滑劑例如硬脂酸鎂。
適用于注射用途的藥用組合物包括滅菌水溶液或分散液，用于臨時調配滅菌注射溶液或分散液的滅菌粉末，或者以乳膏或其它適用于局部應用的形式。載體可以為溶劑或分散介質，包括例如水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇等)、它們的適宜的混合物和植物油。例如，通過使用包衣物例如卵磷脂，通過在分散液情況下維持所需要的粒子大小以及使用表面活性劑，可維持合適的流動性。通過多種抗菌和抗真菌劑，例如對羥基苯甲酸酯、氯代丁醇、苯酚、山梨酸、乙基汞硫代水楊酸鈉等，能夠預防經微生物引起的污染。它可優選包含等滲試劑，例如糖或氯化鈉。通過在組合物中使用延遲吸收劑，例如單硬脂酸鋁和明膠，能夠延長注射組合物的吸收。
通過在合適的溶劑中使以需要的量存在的活性化合物與以上所述的多種其它的成分混合，隨后經過濾滅菌，制備滅菌注射溶液。通常，通過將多種滅菌的活性化合物混合到包含基本分散介質和一種或更多種以上描述的成分的滅菌溶媒中，可制備分散液。在用于制備滅菌注射溶液的滅菌粉末的情況下，制備的優選方法為真空干燥和冷凍干燥，得到得自先前滅菌過濾的溶液的活性化合物加上任何另外需要的成分的粉末。
例如藥用組合物可與惰性稀釋劑或與可吸收的食用載體一起口服給予，可包封在硬或軟殼明膠膠囊中，壓制成片劑，或直接與食物混合。對于口服給藥而言，將活性化合物與賦形劑混合，并且以吞服片劑、口含片劑、糖錠劑、膠囊劑、酏劑、混懸劑、糖漿劑、糯米紙囊劑等的形式使用。這樣的組合物和制劑包含至少1％(重量)的活性化合物。組合物和制劑的百分比可變化并且可介于該單位的約5-約80％(重量)之間。在這樣的治療有效的組合物中活性化合物的量為達到適宜的劑量的量。
片劑、糖錠劑、丸劑、膠囊劑等也可包含粘合劑例如樹膠、阿拉伯膠、玉米淀粉或明膠，賦形劑例如磷酸二鈣，崩解劑例如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、藻酸等，潤滑劑例如硬脂酸鎂，以及可加入甜味劑例如蔗糖、乳糖或糖精或矯味劑例如薄荷、冬青油或櫻桃矯味劑。當單位劑型為膠囊劑時，除以上類型的材料以外，它可包含液體載體。多種其它的材料可作為包衣物存在或改變劑量單位的物理形式。例如，可用紫膠、糖或兩者包衣片劑、丸劑或膠囊劑。糖漿或酏劑可包含活性化合物、作為甜味劑的蔗糖、作為防腐劑的對羥基苯甲酸甲酯和丙酯、染料和矯味劑例如櫻桃或橙矯味劑。當然，用于制備任何劑量單位形式的任何材料在所使用的量下應為藥學上純的和基本上無毒性的。另外，活性化合物可摻入持續釋放的制劑和配方中。
如下描述本發明的一些優選藥用制劑用于口服給藥的片劑用于口服給藥的片劑的成分列于以下表VI中。通過用列于表VI中的前6種成分與聚乙烯吡咯烷酮濕法造粒，隨后加入硬脂酸鎂，然后壓制，制備片劑A、B和C。
用于舌下給藥的片劑用于舌下給藥的兩種片劑的成分列于以下表4中。通過用列于表4中的前6種成分與聚乙烯吡咯烷酮濕法造粒，隨后加入硬脂酸鎂，然后壓制，制備片劑A和B。
用于口含給藥的片劑通過將列于以下表5中的成分混合，隨后直接壓制混合的成分，制備用于口含給藥的片劑。
填充粉末的膠囊制劑兩種填充粉末的膠囊制劑的成分列于以下表6中。通過混合所述成分，并且用所得到的混合物填充兩節-硬明膠膠囊，制備膠囊制劑A和B。
液體填充的膠囊制劑兩種液體填充的膠囊制劑的成分列于以下表7中。通過將Macrogol 4000BP熔融，將活性成分分散在熔融物中，以此填充兩節-硬明膠膠囊，制備膠囊A。通過將活性成分分散在卵磷脂和花生油中，用所得到的分散體填充到軟的、彈性的明膠膠囊中，可制備膠囊B。
控釋膠囊制劑通過將列于以下表8中的前4種成分混合和擠壓，并且使擠壓物團成球狀和干燥，制備用于控釋的膠囊制劑。用乙基纖維素作為控釋膜包衣干燥的小丸，將所得到的小丸填充到兩節-硬明膠膠囊中。
靜脈制劑通過將活性成分溶于枸櫞酸鹽緩沖液中，然后用鹽酸將溶液的pH調至pH7，制備包含列于以下表9中的成分的靜脈制劑。所得到的溶液加至所需體積，隨后通過微孔濾膜過濾，填充到滅菌玻璃管形瓶中并且填充后密封和上面加封。
鼻內制劑通過將活性成分溶于羥基苯甲酸酯的混合物中，然后用在枸櫞酸鹽緩沖液中的鹽酸將溶液的pH調至pH7，制備包含列于以下表10中的成分的鼻內制劑。所得到的溶液加至所需體積，隨后通過微孔濾膜過濾，填充到滅菌玻璃管形瓶中并且填充后密封和上面加封。
肌內注射制劑通過將活性成分溶于Glycofurol中，制備包含列于以下表11中的成分的肌內注射制劑。然后加入苯甲醇并且溶解，用水加至最終體積3ml。隨后通過微孔濾膜將混合物過濾，填充到滅菌玻璃管形瓶中并且填充后密封和上面加封。
糖漿制劑通過將苯甲酸鈉溶于一部分純水中，然后加入山梨醇溶液，制備包含列于以下表12中的成分的糖漿制劑。隨后，加入活性成分且溶解。然后將所得到的溶液與甘油混合并且用純水加至需要的體積。
栓劑制劑通過于45℃的最高溫度下，將五分之一的Witepsol在帶蒸汽夾層的容器中熔融，制備包含列于以下表13中的成分的栓劑制劑。然后通過200μm的篩子來篩分活性成分，并且使用配備切割頭的Silverson混合機將其與熔融的基質混合直到得到平滑的分散體。于45℃維持混合物，向懸浮物中加入剩余的Witepsol H15，將其攪拌以確保成為均勻混合物。使全部懸浮物通過250μm不銹鋼篩，伴隨持續的攪拌，使之冷卻至40℃。在38-40℃的溫度下，將2.0g混合物的等分試樣填充到合適的塑料模具中。使所得到的栓劑冷卻至室溫。
1活性成分作為粉末使用，其中至少90％的粒子的直徑為63μm或以下。氣溶膠制劑通過將活性化合物與乙醇混合，并且加入注射用水，制備包含列于以下表14中的成分的氣溶膠制劑。隨后將該溶液加入到部分拋射劑22中，冷卻至-30℃，并且轉移至填充裝置中。然后將需要的量加到不銹鋼容器中并且用剩余的拋射劑稀釋。然后將閥裝置安裝到容器上。
陰道栓劑通過直接混合列于以下表15中的成分，制備陰道栓劑。通過壓制所得到的混合物制備陰道栓劑。
1活性成分作為粉末使用，其中至少90％的粒子的直徑為63μm或以下。
權利要求
1.一種具有下式的化合物 R為H、OH、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、芳基或(CH2)n-芳基；R1為H、OH、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、C3-C6環烷基、CH＝CH-芳基、C≡C-芳基、(CHR3)n-芳基、NR3-C1-C6烷基、NR3-環烷基、NR3-(CHR3)n-芳基、(CHR3)n-NR3-芳基、(CHR3)n-NR3烷基、(CHR3)n-NR3-環烷基、(CHR3)n-O-芳基、(CHR3)n-O-烷基、(CHR3)n-O-環烷基、O-(CHR3)n-芳基、S-(CHR3)n-芳基或CO-芳基，其中n為0、1或2，并且烷基、環烷基或芳基由以下基團任選取代，包括F、Cl、Br、I、CN、CO2H、CO2R3、NO2、CF3、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的環烷基、取代或未取代的芳基、OCF3、OR3、OSO2-芳基、取代或未取代的胺、NHCOR3、NHSO2R3、CONHR3或SO2NHR3；和R3為H或者取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的芳基。
2.權利要求1的化合物，其中R1選自-CH3、Br、 和
3.權利要求1的化合物，其中烷基、環烷基或芳基由以下基團任選取代，包括F、Cl、Br、I、CN、CO2H、CO2R3、NO2、CF3、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的環烷基、取代或未取代的芳基、OH、OCH3、OCF3、OR3、OSO2-芳基、取代或未取代的胺、NHCOR3、NHSO2R3、CONHR3或SO2NHR3，且R3為C1-C6烷基。
4.權利要求1的化合物，其中R為H或甲基和R1為苯基、芐基、芐氧基、芐基胺、苯基氨基甲基或2-甲基-4-氟代苯基氨基甲基。
5.一種具有下式的化合物 R和R2獨立為H、OH、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、芳基或(CH2)n-芳基；R1為H、OH、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、C3-C6環烷基、CH＝CH-芳基、C≡C-芳基、(CHR3)n-芳基、NR3-C1-C6烷基、NR3-環烷基、NR3-(CHR3)n-芳基、(CHR3)n-NR3-芳基、(CHR3)n-NR3-烷基、(CHR3)n-NR3-環烷基、(CHR3)n-O-芳基、(CHR3)n-O-烷基、(CHR3)n-O-環烷基、O-(CHR3)n-芳基、S-(CHR3)n-芳基或CO-芳基，其中n為0、1或2，并且烷基、環烷基或芳基由以下基團任選取代，包括F、Cl、Br、I、CN、CO2H、CO2R3、NO2、CF3、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的環烷基、取代或未取代的芳基、OCF3、OR3、OSO2-芳基、取代或未取代的胺、NHCOR3、NHSO2R3、CONHR3或SO2NHR3；和R3為H或者取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的芳基。
6.權利要求5的化合物，其中R1選自-CH3、Br、 和
7.權利要求5的化合物，其中R為H和R1為苯氧基。
8.權利要求5的化合物，其中R為H和R1為2-甲基苯氧基。
9.權利要求5的化合物，其中R為H和R1為2-甲基-4-氟代苯氧基。
10.一種具有下式的化合物 R為H、OH、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、芳基或(CH2)n芳基；R1和R2獨立為H、OH、F、Cl、Br、I、C1-C6烷基、C3-C6環烷基、CH＝CH-芳基、C≡C-芳基、(CHR3)-芳基、NR3-C1-C6烷基、NR3-環烷基、NR3-(CHR3)n-芳基、(CHR3)n-NR3-芳基、(CHR3)n-NR3-烷基、(CHR3)n-NR3-環烷基、(CHR3)n-O-芳基、(CHR3)n-O-烷基、(CHR3)n-O-環烷基、O-(CHR3)n-芳基、S-(CHR3)n-芳基或CO-芳基，其中n為0、1或2，并且烷基、環烷基或芳基由以下基團任選取代，包括F、Cl、Br、I、CN、CO2H、CO2R3、NO2、CF3、取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的環烷基、取代或未取代的芳基、OCF3、OR3、OSO2-芳基、取代或未取代的胺、NHCOR3、NHSO2R3、CONHR3或SO2NHR3；和R3為H或者取代或未取代的C1-C6烷基、取代或未取代的芳基。
11.權利要求10的化合物，其中R1選自-CH3、Br、 和
12.一種抑制患者體內磷酸肌醇3-激酶的方法，該方法包括給予患者一定量的有效抑制患者體內磷酸肌醇3-激酶的權利要求1、5或10的化合物。
13.權利要求12的方法，該方法包括給予以劑量形式的一定量。
14.權利要求13的方法，其中所述劑量為片劑、膠囊劑、靜脈制劑、鼻內制劑、經皮制劑、肌注制劑、糖漿劑、栓劑、氣溶膠或陰道栓劑的形式。
15.權利要求14的方法，其中配制所述片劑用于口服、舌下或口含給藥。
16.權利要求13的方法，其中所述劑量包含約5至約500mg的所述化合物。
17.權利要求16的方法，其中所述劑量包含約25至約300mg的所述化合物。
18.一種預防或治療心血管疾病的方法，該方法包括給予需要的患者有效量的權利要求1、5或10的化合物。
19.權利要求18的方法，其中所述心血管疾病為例如冠狀動脈閉塞、中風、急性冠狀動脈綜合征、急性心肌梗死、再狹窄、動脈粥樣硬化或不穩定性心絞痛。
20.權利要求18的方法，該方法包括給予以劑量形式的一定量。
21.權利要求20的方法，其中所述劑量為片劑、膠囊劑、靜脈制劑、鼻內制劑、經皮制劑、肌注制劑、糖漿劑、栓劑、氣溶膠或陰道栓劑的形式。
22.權利要求21的方法，其中配制所述片劑用于口服、舌下或口含給藥。
23.權利要求20的方法，其中所述劑量包含約5至約500mg的所述化合物。
24.權利要求23的方法，其中所述劑量包含約25至約300mg的所述化合物。
25.一種預防或治療呼吸疾病的方法，該方法包括給予需要的患者有效量的權利要求1、5或10的化合物。
26.權利要求25的方法，其中所述呼吸疾病為哮喘、慢性阻塞性肺疾病或支氣管炎。
27.權利要求25的方法，該方法包括給予以劑量形式的一定量。
28.權利要求27的方法，其中所述劑量為片劑、膠囊劑、靜脈制劑、鼻內制劑、經皮制劑、肌注制劑、糖漿劑、栓劑、氣溶膠或陰道栓劑的形式。
29.權利要求28的方法，其中配制所述片劑用于口服、舌下或口含給藥。
30.權利要求27的方法，其中所述劑量包含約5至約500mg的化合物。
31.權利要求30的方法，其中所述劑量包含約25至約300mg的化合物。
32.一種預防或治療癌癥的方法，該方法包括給予需要的患者有效量的權利要求1、5或10的化合物。
33.權利要求32的方法，其中所述癌癥為神經膠質瘤、前列腺癌、小細胞肺癌或乳腺癌。
34.權利要求32的方法，該方法包括給予以劑量形式的一定量。
35.權利要求34的方法，其中所述劑量為片劑、膠囊劑、靜脈制劑、鼻內制劑、經皮制劑、肌注制劑、糖漿劑、栓劑、氣溶膠或陰道栓劑的形式。
36.權利要求35的方法，其中配制所述片劑用于口服、舌下或口含給藥。
37.權利要求34的方法，其中所述劑量包含約5至約500mg的化合物。
38.權利要求37的方法，其中所述劑量包含約25至約300mg的化合物。
39.一種預防或治療與不正常的白細胞功能有關的疾病的方法，該方法包括給予需要的患者有效量的權利要求1、5或10的化合物。
40.權利要求39的方法，其中所述疾病為自身免疫疾病或炎性疾病。
41.權利要求39的方法，該方法包括給予以劑量形式的一定量。
42.權利要求41的方法，其中所述劑量為片劑、膠囊劑、靜脈制劑、鼻內制劑、經皮制劑、肌注制劑、糖漿劑、栓劑、氣溶膠或陰道栓劑的形式。
43.權利要求42的方法，其中配制所述片劑用于口服、舌下或口含給藥。
44.權利要求41的方法，其中所述劑量包含約5至約500mg的化合物。
45.權利要求44的方法，其中所述劑量包含約25至約300mg的化合物。
全文摘要
嗎啉代基取代的吡啶并嘧啶、喹諾酮和苯并吡喃酮衍生物抑制磷酸肌醇(PI)3－激酶，該酶調節血小板粘附過程。結果，所述化合物具有抗血栓形成的活性，以及其它的藥物性質。所要求的化合物由式(I)、(II)和(III)示。PI 3－激酶生成3－磷酸化PI第二信使，其刺激血流條件下的血小板粘附。因為血小板粘附是血栓形成中的必需步驟，在這樣的條件下通過這些化合物抑制PI 3－激酶可抑制或預防血栓形成。所述化合物用于治療PI 3－激酶依賴性疾病，包括心血管疾病例如冠狀動脈閉塞、中風、急性冠狀動脈綜合征、急性心肌梗死、血管再狹窄、動脈粥樣硬化和不穩定性心絞痛，呼吸疾病例如哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和支氣管炎，炎性疾病，腫瘤包括癌癥例如神經膠質瘤、前列腺癌、小細胞肺癌和乳腺癌，以及與不正常的白細胞功能有關的疾病，例如自身免疫和炎性疾病。
文檔編號C07D311/22GK1418195SQ01806752
公開日2003年5月14日 申請日期2001年1月24日 優先權日2000年1月24日
發明者A·D·羅伯森, S·杰克森, V·肯徹, C·艾普, H·帕拉巴哈蘭, P·湯普森 申請人:基納西亞股份有限公司