專利名稱：用于降解擬除蟲菊酯的方法和物質的制作方法
用于降解擬除蟲菊酯的方法和物質
參考序列表
本說明書附有包括SEQ ID NOS: 1_4的序列表，將其全文通過引用合并入本文。發明領域
本發明涉及用于降解擬除蟲菊酯例如氯菊酯的方法，用于進行該降解的酶促組 合物，以及其它方面。
背景
擬除蟲菊酯是與由菊花產生的天然殺蟲劑除蟲菊素相似的一組人造殺蟲劑。擬 除蟲菊酯被廣泛用于控制各種昆蟲。擬除蟲菊酯抑制昆蟲的神經系統。存在在化學結構 和暴露的癥狀上不同的兩種類型。I型擬除蟲菊酯包括烯丙菊酯、胺菊酯、芐呋菊酯、右 旋苯醚菊酯、生物芐呋菊酯和氯菊酯。II型擬除蟲菊酯的一些實例是氯氰菊酯、氟氯氰 菊酯、溴氰菊酯、苯醚氰菊酯、氰戊菊酯和氟氰胺菊酯。I和II型擬除蟲菊酯都抑制昆 蟲的神經系統。該抑制在神經細胞膜的鈉離子通道上發生。一些擬除蟲菊酯也影響稱為 GABA的神經遞質的作用。在許多用于控制昆蟲的商業產品(包括家用殺蟲劑、寵物噴 霧劑(pet sprays)和洗發劑)中發現有擬除蟲菊酯。一些擬除蟲菊酯也用作直接用于頭的 虱治療和用作可用于衣服的驅蚊劑。
氯菊酯是擬除蟲菊酯種類的殺蟲劑的成員。由于氯菊酯對水生生物的高 毒性，因此，除了用作大面積蚊子殺成蟲劑外，其為美國環境保護署(UnitedStates Environmental Protection Agency，EPA)對于農作物和大面積應用限制使用的殺蟲劑。然而，其被分類為用于住宅和工業應用的普遍使用的殺蟲劑。根據EPA數據，每年有大約 2百萬磅氯菊酯被用于農業、住宅和公共衛生使用場所。
氯菊酯，除了其由人使用時具有相對安全性以外，還以昆蟲/節肢動物驅除性 著稱。因此，氯菊酯的另一個主要用途是在地毯料(carpeting)制造中用作防蛀劑。作為 制造過程的部分，會產生含氯菊酯的廢水(effluent)。所得的廢水對地毯制造工業產生了 處理和處置問題，因為由于其潛在的毒性，廢水不能直接排放入環境。
因此，必須小心操作，因為已知如果不注意地將其引入水流或水循環的話，氯 菊酯可毒害魚類。在哺乳動物中，氯菊酯通過改變神經膜鈉通道的正常生物化學和生理 學來改變神經功能。人的中毒癥狀包括皮膚和眼睛的刺激、對聲音或觸摸的易怒性、異 常的面部感覺、皮膚上的刺痛、麻刺或發癢(creeping)的感覺、麻木、頭痛、眩暈、惡 心、嘔吐、腹瀉、過度唾液分泌和疲勞。
因此需要無毒的、環境安全和用戶友好的、能夠解除廢水以及其他溶液和混合 物中的氯菊酯毒性的擬除蟲菊酯去污染劑，例如氯菊酯去污染劑。還需要可作用于不存 在于溶液中的氯菊酯的擬除蟲菊酯去污染劑，例如氯菊酯去污染劑。本文中所示的公開 內容滿足和解決了這些需要。
概述
本文中提供了降解擬除蟲菊酯例如氯菊酯的方法，所述方法包括將擬除蟲菊酯 與含有有機磷水解酶(organophosphatehydrolase，ΟΡΗ)的組合物接觸。本文中還提供了降解樣品中的擬除蟲菊酯例如氯菊酯的方法，所述方法包括將樣品與含有有機磷水解酶 (OPH)的組合物接觸。在一個方面，擬除蟲菊酯例如氯菊酯被完全降解。在另一個方 面，擬除蟲菊酯例如氯菊酯被部分降解。
本文中還提供了使樣品中的擬除蟲菊酯例如氯菊酯失活的方法，所述方法包括 將樣品與含有OPH的組合物接觸。
本文中還提供了使樣品中擬除蟲菊酯例如氯菊酯的活性降低的方法，所述方法 包括將樣品與含有OPH的組合物接觸。在一個方面，樣品具有在大約6.5至9.0范圍內 的ρΗ。在另一個方面，ρΗ為大約8.5。在另一個方面，將樣品的ρΗ調整至8.5。在 一個方面，樣品的溫度在大約20°C至30°C的范圍內。在另一個方面，樣品的溫度是大約 22 °C。
在一個方面，含有擬除蟲菊酯的樣品例如含有氯菊酯的樣品是來自制造過程的 廢水。在一個方面，所述制造過程包括用擬除蟲菊酯例如氯菊酯處理地毯料。
本文中還提供了降解樣品中的擬除蟲菊酯例如氯菊酯的方法，所述方法包括將 樣品與含有表達OPH的微生物的組合物接觸。在一個方面，所述微生物是細菌。
本文中還提供了降解擬除蟲菊酯的組合物例如降解氯菊酯的組合物，所述組合 物包含至少一種分離的酶。在一個方面，降解擬除蟲菊酯的組合物例如降解氯菊酯的組 合物包含ΟΡΗ。在一個方面，提供了 OPH用于降解擬除蟲菊酯的用途。
附圖概述
附圖被合并入本說明書中并且構成本說明書的一部分，其舉例說明了各種實施方案。


圖1圖解說明了在15分鐘的時間過程中樣品中剩余的氯菊酯的量。
圖2舉例說明了 OWi的降解氯菊酯的活性作為溫度的函數。Offl活性表示為每 克酶的OPH單位數。
圖3舉例說明了 OPH的降解氯菊酯的活性作為ρΗ的函數。OPH活性表示為每 克酶的OPH單位數。
圖4舉例說明了 OPH的降解氯菊酯的活性作為緩沖液濃度的函數。OPH活性表 示為相對活性百分比。
發明詳述
本文中提供了降解擬除蟲菊酯的方法，所述方法包括將擬除蟲菊酯與含有有機 磷水解酶(OPH)的組合物接觸。
此外，提供了降解擬除蟲菊酯例如氯菊酯的方法，其中擬除蟲菊酯存在于樣品 中，所述方法包括將樣品與含有有機磷水解酶(OPH)的組合物接觸。
在一個方面，完全降解或至少部分降解該擬除蟲菊酯。
擬除蟲菊酯因具有殺昆蟲性質而著稱(參見，例如US 2007/0276013Α1、 WO 2005077186、WO 93-22297、WO 93-10 083、DE-A 2 641 343、ΕΡ-Α-347 488、 ΕΡ-Α-210 487、美國專利 3,264,177 和 ΕΡ-Α-234 045)。
在一個方面，擬除蟲菊酯選自已知來自ΕΡ-Α-048 186的氟丙菊酯、已知來自EP-A-067 46的順式氯氰菊酯、已知來自EP_A_206 149的高效氟氯氰菊酯、已知 來自DE-A-2 802 962的氯氟氰菊酯、已知來自DE_A_2 326 077的氯氰菊酯、已知來 自DE-A-2 3 077的溴氰菊酯、已知來自DE-A-2 737四7的高效氰戊菊酯、已知來自 DE-A-3 117 510的醚菊酯、已知來自DE-A-2 231 312的甲氰菊酯、已知來自DE_A_2 335 347的氰戊菊酯、已知來自DE-A-2 757 066的氟氰戊菊酯、已知來自EP_A_106 469 的高效氯氟氰菊酯、已知來自DE-A-2 3 077的氯菊酯、已知來自EP_A_038 617的氟 胺氰菊酯、已知來自DE-A-2 742 546的四溴菊酯、已知來自EP_A_(^6 542的zeta-氟 氯氰菊酯、已知來自DE-A-2709 264的氟氯氰菊酯、已知來自EP_A_049 977的聯苯菊 酯、已知來自DE-A-2653189的乙氰菊酯、已知來自DE-A-3604781的eflusilanate、已知 來自 DE-A-37 08 231 的氟螨醚(fubfenprox)、已知來自 PesticideManual 1997、issue 11、 第1056頁的除蟲菊素、已知來自GB-A-I 168 797的芐呋菊酯(已知來自"The Pesticide Manual、第 13 版、2003、第 232 頁的條目 197、by The British Crop Protection Council)的 精高效氯氟氰菊酯和苯醚菊酯。
在一個方面，擬除蟲菊酯選自氟丙菊酯、烯丙菊酯(右旋-順-反式、右旋-反 式)、高效氟氯氰菊酯、聯苯菊酯、生物烯丙菊酯、生物烯丙菊酯-5-環戊基-異構體、 生物氯菊酯、生物氯菊酯、生物芐呋菊酯、二氯炔戊菊酯(chlovaporthrin)、順-氯氰菊 酯、順-芐呋菊酯、順-氯菊酯、功夫菊酯(clocythrin)、乙氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氟氰 菊酯、氯氰菊酯(α-、β-、θ-、ζ-)、苯醚氰菊酯、溴氰菊酯、右旋烯炔菊酯(1R-異 構體)、順式氰戊菊酯、醚菊酯、五氟苯菊酯、甲氰菊酯、吡氯氰菊酯、氰戊菊酯、溴 氟菊酯、氟氰戊菊酯、三氟醚菊酯(fhifenprox)、氟氯苯菊酯、氟氰胺菊酯、芐螨醚、精 高效氯氟氰菊酯、炔咪菊酯、噻恩菊酯、高效氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin)、甲氧卞 氟菊酯、氯菊酯(順_、反_)，苯醚菊酯(1R-反式異構體)、右旋炔丙菊酯、丙氟菊 酯、protrifenbute、pyresmethrin、芐呋菊酯、RU 15525、氟硅菊酯(silafluofen)、氟胺氰 菊酯、七氟菊酯、環戊烯丙菊酯、胺菊酯(-1R-異構體)、四溴菊酯、四氟苯菊酯、ZXI 8901、除蟲菊素類(除蟲菊素).。
在一個方面，擬除蟲菊酯選自氟丙菊酯、順式氯氰菊酯、高效氟氯氰菊酯、氯 氟氰菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯、順式氰戊菊酯、醚菊酯(ethofenprox)、甲氰菊酯、 氰戊菊酯、氟氰戊菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟胺氰菊酯、氟氰胺菊酯、四溴菊 酯、zeta-氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、聯苯菊酯、乙氰菊酯、eflusilanate，芐螨醚、除蟲 菊素、芐呋菊酯、精高效氯氟氰菊酯、烯丙菊酯、胺菊酯、右旋苯醚菊酯、生物芐呋菊 酯、苯醚氰菊酯和苯醚菊酯。
在一個方面，擬除蟲菊酯選自烯丙菊酯、胺菊酯、芐呋菊酯、右旋苯醚菊酯、 生物芐呋菊酯和氯菊酯。
在一個方面，擬除蟲菊酯選自氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、苯醚氰菊 酯、氰戊菊酯和氟氰胺菊酯。
在一個方面，擬除蟲菊酯選自氯菊酯、芐呋菊酯和苯醚菊酯。
在一個方面，擬除蟲菊酯是氯菊酯。
氯菊酯是擬除蟲菊酯的一個實例，其是在例如農業以及材料生產和加工等領域 中廣泛使用的化合物。然而，氯菊酯以及其他擬除蟲菊酯對魚和各種哺乳動物是有毒的，因此必需小心地操作和處置來自氯菊酯的工業和商業使用的含有氯菊酯的廢物。例 如，來自地毯制造過程中的含氯菊酯廢水帶來了操作和處置問題。本文中顯示有機磷水 解酶(OPH)可降解氯菊酯。通過使用高效催化酶處理氯菊酯廢物和含氯菊酯組合物，可 避免使用額外的有毒或昂貴的化學品。
1.定義和縮寫
按照本文詳述，使用下列縮寫和定義。應當指出，如本文中所使用的，除非上 下文中明確地指出，否則單數形式無定冠詞和有定冠詞(一個(種)或這/該(種)等) 的指代物包括多個(種)所指物。因此，例如，提到“酶”，包括許多這樣的酶，提到“制劑”包括提到一種或多種制劑以及對于本領域技術人員來說是已知的其等價物，等寸。
除非另外定義，否則本文中使用的所有技術和科學術語都具有與本領域技術人 員通常理解的相同的意義。在下文中提供下列術語。
1.1.定義
如本文中所使用的，術語“表達”是指籍以依據基因的核酸序列產生多肽的過 程。該過程包括轉錄和翻譯。
“分離的”意指序列至少大體上不含至少一種與該序列天然結合并且在自然界 (例如基因組序列)中發現的其他成分。
“純化的”意指材料以相對純的狀態存在，例如至少大約90%純、至少大約 95%純或至少大約96%、97%, 98%或99%純。
如本文中所使用的，“氨基酸序列”與術語“多肽”和/或術語“蛋白質”同 義。在一些情況下，術語“氨基酸序列”與術語“肽”同義；在一些情況下，術語“氨 基酸序列”與術語“酶”同義。
如本文中所使用的，“核苷酸序列”或“核酸序列”是指寡核苷酸序列或多核 苷酸和其變體、同源物、片段和衍生物。核苷酸序列可以是基因組來源的、合成或重組 來源的序列，可以是雙鏈或單鏈，無論代表有義鏈還是反義鏈。如本文中所使用的，術 語“核苷酸序列”包括基因組DNA、cDNA、合成的DNA和RNA。
如本文中所使用的，“合成的”化合物是通過體外化學或酶促合成產生的。其 包括，但不限于，使用宿主生物例如酵母細胞宿主或選擇的其他表達宿主的最佳密碼子 用法產生的變體核酸。如本文中所使用的，“ΟΡΗ活性”是指本文中所示的對氯菊酯的 降解。
7“樣品”，當在本文中使用該術語時，是可含有氯菊酯的任何物質。 1.2.縮寫除非另外指出，否則應用下列縮寫 cDNA 互補 DNA DEAE 二乙氨基乙醇DNA 脫氧核糖核酸EC 酶分類的酶學委員會(enzyme commission for enzyme classification) GCMS 氣相色譜-質譜法 HPLC 高效液相色譜
mRNA 信使核糖核酸
OP 有機磷酸鹽/酯
OPH 有機磷水解酶
PCR 聚合酶鏈反應
ppm 百萬分率(parts per million)
RT-PCR 逆轉錄酶聚合酶鏈反應
SDS-PAGE十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳
IXSSC 0.15M NaCL 0.015M 檸檬酸鈉、pH 7.0
w/v 重量/體積
w/w 重量/重量
2.用于除去擬除蟲菊酯污染的方法和組合物
2.1.組合物
本文中公開的用于除去擬除蟲菊酯例如氯菊酯污染的組合物包含有機磷水解酶 (ΟΡΗ)。OPPi，也稱為磷酸三酯酶，在本文中顯示可降解氯菊酯。如本文中所公開的， 去除污染的酶促方法提供了優于其他去污劑的重大優勢。作為催化劑，酶是高效的并且 可在數分鐘或甚至數秒內對許多倍于其自身重量的污染物進行解毒。
ΟΡΗ,最初稱為對硫磷水解酶，是在許多細菌分離中發現的酶。OPH具有抗多 種有機磷酸鹽/酯(OP)化合物包括化學戰神經毒劑的活性。許多研究者已研究了 OPPi， 關于結構和功能的信息可見于本領域中(例如、Mulbry等人、J.Bacteriol. (1989) 171 : 6740-6746 ； RausheL Cum Opin.Microbiol. (2002) 5 288-295)。
在一個方面，“有機磷水解酶”、“ΟΡΗ”、“磷酸三酯酶”、“PTE”，如本文中所使用的，是指在例如有機磷酸酯(OP)的水解中，具有作用于有機磷化合物(例如 對氧磷)(包括膦酸和次膦酸的酯)的能力的任何芳二烷基磷酸酶(E.C.3.1.8.1)。
OPH的常用的其他名稱包括對氧磷酶、A-酯酶、芳基三磷酸(酯) 酶、有機磷酯酶、酯酶Bi、酯酶E4、對氧磷酯酶、甲基對氧基嘧啶磷酯酶 (pirimiphos-methyloxonesterase) ； OPA酸酐酶、有機磷水解酶、對氧磷水解酶、有機磷 酸酸酐酶。
該酶的基因已被克隆、測序并且在許多原核和真核宿主生物中進行了表 達。OPH酶的2個常見來源是從缺陷假單胞菌(Pseudomonas diminuta) MG和黃桿菌 (Flavobacterium sp.)菌株ATCC 27551分離的相同的opd基因。缺陷假單胞菌MG opd基 因由McDaniel等人((1989) J.Bacteriol.、170 2306-2311 ；以其全文通過引用合并入本 文)分離。McDaniel等人的opd基因(登錄號為M20392)在Genebank中注釋如下，并且 以其全文通過引用合并入本文LOCUS PSEPTE 1322bp DNA BCT，1996年4月21日， DEFINITION PlasmidpCMSl (來自缺陷假單胞菌)磷酸二酯酶(opd)基因、完全編碼序 列.登錄號 M20392 NID gl51517 VERSION M20392.1 GI 151517。來自缺陷假單胞菌序 列的氨基酸序列示于SEQ ID NO 1中。
opd基因的開放閱讀框架，如由McDaniel等人報導的，包含975個堿基，編碼具 有35kDa分子量的325個氨基酸殘基的OPH多肽。Mulbry等人(J.Bacteriol. (1989) 171 6740-6746 ；以其全文通過引用合并入本文)也克隆了 opd基因，但該克隆相對于上述opd 基因缺少 4 個氨基端殘基 Mer-Ile-Gly-Thr 或 SIGT) (SEQ ID NO 2)。
黃桿菌MTCC 2495的有機磷水解酶的氨基酸序列示于SEQ ID NO 4中。示于 SEQ ID NO 3中的氨基酸序列與SEQ ID NO 4有1個氨基酸的差異，即在末端缺少絲氨酸。
在另外的方面，OPH包含具有SEQ ID No.l的氨基酸序列。在另外的方面， OPH包含具有SEQ ID No.3的氨基酸序列。在另外的方面，OPH包含具有SEQ ID No.4的氨基酸序列。
還確定了 OPH的三維晶體結構，其顯示天然酶是每亞基含有2個Zn2+離子的均 二聚體。Co2+置換的酶對具有P-F和P-S鍵的神經毒劑和底物具有更大的活性(Omburo 等人、J.Biol.Chem. (1992)沈7 13278-13283)。雖然與其他降解化學試劑的酶相比較已 對OPH進行了更多的研究，但其細胞功能和天然底物仍然未知。
在一個方面，提供了與本文中定義的氨基酸序列或與具有本文中定義的特殊性 質的多肽具有一定程度的序列同一性或序列同源性的多肽的用途。在一個方面，提供了 與SEQ ID No.l、SEQ ID No.3或SEQ ID No.4具有一定程度的序列同一性的肽或其同源 物。此處，術語“同源物”意指與受試氨基酸序列或受試核苷酸序列具有序列同一性的 實體。此處，術語“同源性”可等同于“序列同一性”。
同源氨基酸序列和/或核苷酸序列應當提供和/或編碼保持OPH酶的功能活性 和/或增強其活性的多肽。
在本說明書中，同源序列包括可與受試序列至少50%，優選至少55%，例如至 少60%，例如至少65%，至少70%，至少75%，至少80%，至少85%，至少90%，至 少95%，至少96%，至少97%，至少98%或至少99%同一的氨基酸序列。通常，同源 物將包括與受試氨基酸序列相同的活性位點等。雖然也可在相似性(即具有相似的化學 性質/功能的氨基酸殘基)方面考慮同源性，但在本發明的背景中，優選以序列同一性表 述同源性。
在一個實施方案中，OPH酶是具有SEQ IDNo 1、3或4中顯示的序列或與其具 有至少50%，優選至少55%，例如至少60%，例如至少65%，至少70%，至少75%， 至少80%，至少85%，至少90%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%或至少 99%序列同一性的序列的有機磷水解酶。
可通過眼睛或更常用地借助于可容易獲得的序列比較程序來進行序列同一性比 較。此類可商購獲得的計算機程序使用復雜的比較算法來比對兩個或更多個序列，以最 佳地反映出可能已導致所述兩個或更多個序列之間的差異的進化事件。因此，此類算法 使用評分系統進行操作，其中相同或相似氨基酸獲得獎賞(評分)，而插入缺口、缺口延 伸和不相似氨基酸的比對獲得罰分。比較算法的評分系統包括
i)每一次插入缺口時賦予罰分(缺口罰分，gap penalty score)，
ii)每一次將已有缺口延伸額外位點時，賦予罰分(延伸罰分，extension penalty score),
iii)當比對相同氨基酸時賦予高評分，和
iv)當比對非相同氨基酸時賦予可變的評分。
大多數比對程序允許對缺口罰分作修改。然而，當使用這樣的軟件進行序列比9較時，優選使用缺省值。
對非相同氨基酸的比對所給予的評分根據評分矩陣(scoring matrix)(也稱為替換 矩陣(substitution matrix))賦予。這樣的替換矩陣中提供的評分反映了在進化過程中一 個氨基酸被另一個氨基酸置換的可能性各有不同并且取決于被置換的氨基酸的物理/化 學性質這樣的事實。例如，極性氨基酸被另一個極性氨基酸所置換的可能性高于被疏水 性氨酸置換的可能性。因此，評分矩陣將為相同的氨基酸賦予最高的評分，為不相同但 相似的氨基酸賦予較低的評分，為不相同不相似的氨基酸賦予甚至更低的評分。最常使 用的評分矩陣是PAM矩陣(Dayhoff等人(1978)、Jones等人(1992))、BLOSUM矩陣 (Henikoff 和 Henikoff (1992))和 Gonnet 矩陣(Gonnet 等人(1992))。
進行這樣的比對的合適計算機程序包括但不限于Vector NTI (Invitrogen Corp.)以 及 ClustalV、ClustalW 和 ClustalW2 程序(Higgins DG & Sharp PM (1988)、Higgins 等人 (1992)、Thompson等人(1994)、Larkin等人Q007))。不同比對工具的選擇可在www. expasv.org上從ExPASy Proteomics服務器獲得。可進行序列比對的軟件的另一個實例 是BLAST (基礎局部比對檢索工具)，其可從目前可在//www.ncbi.nlm、nih.gov/上 找到的美國國立生物技術信息中心的網頁獲得，并且最早在Altschul等人(1990)J.Mol. Biol.215 ； 403-410 中進行了描述。
在軟件已產生比對后，就可能計算相似性百分比和序列同一性百分比。軟件通 常將這作為序列比對的一部分來完成并且產生數值結果。
在一個實施方案中，優選使用ClustalW軟件進行序列比對。優選，使用下列用 于配對比對的參數來進行使用ClustalW的比對
權利要求
1.降解擬除蟲菊酯的方法，所述方法包括將擬除蟲菊酯與含有有機磷水解酶(OPH) 的組合物接觸。
2.權利要求1的方法，其中所述擬除蟲菊酯存在于樣品中，所述方法包括將樣品與含 有有機磷水解酶(OPH)的組合物接觸。
3.權利要求1至2中任一項的方法，其中擬除蟲菊酯被完全降解或至少部分降解。
4.權利要求1至3中任一項的方法，其中所述擬除蟲菊酯選自氟丙菊酯、順式氯氰 菊酯、高效氟氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯、順式氰戊菊酯、醚菊酯、 甲氰菊酯、氰戊菊酯、氟氰戊菊酯、高效氯氟氰菊酯、氯菊酯、氟胺氰菊酯、氟氰胺菊 酯、四溴菊酯、zeta-氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、聯苯菊酯、乙氰菊酯、eflusilanate、除蟲 菊素、芐呋菊酯、Y-氯氟氰菊酯、烯丙菊酯、胺菊酯、右旋苯醚菊酯、生物芐呋菊酯、 苯醚氰菊酯和苯醚菊酯。
5.權利要求1至4中任一項的方法，其中所述擬除蟲菊酯選自烯丙菊酯、胺菊酯、芐 呋菊酯、右旋苯醚菊酯、生物芐呋菊酯和氯菊酯。
6.權利要求1至4中任一項的方法，其中所述擬除蟲菊酯選自氯氰菊酯、氟氯氰菊 酯、溴氰菊酯、苯醚氰菊酯、氰戊菊酯和氟氰胺菊酯。
7.權利要求1至6中任一項的方法，其中所述擬除蟲菊酯選自氯菊酯、芐呋菊酯和苯 醚菊酯。
8.權利要求1至7中任一項的方法，其中所述擬除蟲菊酯是氯菊酯。
9.權利要求2至8中任一項的方法，其中所述樣品具有在大約6.5至大約9.0范圍內 的pH。
10.權利要求2至9中任一項的方法，其中pH是大約8.5。
11.權利要求10的方法，其中將樣品的pH調整至8.5。
12.權利要求2至11中任一項的方法，其中樣品的溫度在大約20°C至30°C的范圍內。
13.權利要求12的方法，其中樣品的溫度是大約22°C。
14.權利要求2至13中任一項的方法，其中所述樣品是來自制造過程的廢水。
15.權利要求14的方法，其中所述制造過程包括使用擬除蟲菊酯處理地毯料。
16.降解樣品中的擬除蟲菊酯的方法，所述方法包括將所述樣品與含有表達OPH的微 生物的組合物接觸。
17.權利要求16的方法，其中所述微生物是細菌。
18.使擬除蟲菊酯失活的方法，所述方法包括將擬除蟲菊酯與含有OPH的組合物接觸。
19.使擬除蟲菊酯的活性降低的方法，所述方法包括將擬除蟲菊酯與含有OPH的組合 物接觸。
20.使樣品中的擬除蟲菊酯失活的方法，所述方法包括將所述樣品與含有OPH的組合 物接觸。
21.使樣品中的擬除蟲菊酯的活性降低的方法，所述方法包括將所述樣品與含有OPH 的組合物接觸。
22.權利要求15至21中任一項的方法，其中所述擬除蟲菊酯是氯菊酯。
23.降解擬除蟲菊酯的組合物，所述組合物包含至少一種分離的酶。
24.權利要求22的組合物，其包含ΟΡΗ。
25.權利要求23至24中任一項的組合物，其中所述擬除蟲菊酯是氯菊酯。
26.0ΡΗ用于降解擬除蟲菊酯的用途。
27.權利要求26的用途，其中所述擬除蟲菊酯是氯菊酯。
全文摘要
本發明提供了用于對擬除蟲菊酯例如氯菊酯進行酶促解毒的方法和組合物。所述方法包括將有機磷水解酶OPH的組合物施加到被擬除蟲菊酯例如氯菊酯污染的表面或物質上。
文檔編號A62D3/02GK102026688SQ200980115334
公開日2011年4月20日 申請日期2009年4月29日 優先權日2008年4月30日
發明者C·克斯塔博利 申請人:丹尼斯科美國公司