本發明涉及(ji)生物(wu)領域，尤其涉及(ji)活性肽組(zu)合物(wu)在制備促進臍帶造(zao)血干細(xi)胞(bao)增殖藥物(wu)中(zhong)的應用。

背景技術：

1、隨著(zhu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)技(ji)術的(de)(de)飛速發(fa)展，造(zao)血干細(xi)(xi)胞(bao)(bao)在多(duo)種疾病的(de)(de)治(zhi)療中(zhong)展現(xian)出廣(guang)闊(kuo)的(de)(de)應用(yong)前(qian)景。造(zao)血干細(xi)(xi)胞(bao)(bao)是血液(ye)系統(tong)中(zhong)較原始(shi)和(he)具有自(zi)我更新和(he)多(duo)向(xiang)分(fen)化潛(qian)能(neng)的(de)(de)一類特殊細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，它們(men)在維持人體血液(ye)系統(tong)穩態(tai)、修(xiu)復損傷(shang)組織以(yi)及治(zhi)療多(duo)種疾病方(fang)面發(fa)揮著(zhu)至關重要的(de)(de)作用(yong)，是醫學領域中(zhong)最具潛(qian)力的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)類型(xing)之一。

2、臍(qi)(qi)帶(dai)造(zao)(zao)(zao)(zao)血(xue)(xue)(xue)干(gan)(gan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，具有(you)采集(ji)方便的(de)(de)(de)(de)優點，并且相較(jiao)于(yu)骨髓(sui)造(zao)(zao)(zao)(zao)血(xue)(xue)(xue)干(gan)(gan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)和(he)外周(zhou)血(xue)(xue)(xue)造(zao)(zao)(zao)(zao)血(xue)(xue)(xue)干(gan)(gan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)來說，臍(qi)(qi)帶(dai)造(zao)(zao)(zao)(zao)血(xue)(xue)(xue)干(gan)(gan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)收集(ji)過程(cheng)更為(wei)簡單和(he)安(an)全，取血(xue)(xue)(xue)過程(cheng)對母體和(he)嬰(ying)兒無任(ren)何干(gan)(gan)擾。再者，臍(qi)(qi)帶(dai)造(zao)(zao)(zao)(zao)血(xue)(xue)(xue)干(gan)(gan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)免(mian)疫(yi)原性較(jiao)低，能(neng)(neng)夠大大減少移植過程(cheng)中(zhong)的(de)(de)(de)(de)免(mian)疫(yi)排斥反(fan)應，無副作用，移植成功率較(jiao)高。臍(qi)(qi)帶(dai)造(zao)(zao)(zao)(zao)血(xue)(xue)(xue)干(gan)(gan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)不僅能(neng)(neng)夠分化(hua)為(wei)血(xue)(xue)(xue)液(ye)系(xi)(xi)統中(zhong)的(de)(de)(de)(de)紅細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)、白細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)和(he)血(xue)(xue)(xue)小板(ban)，還能(neng)(neng)夠分化(hua)為(wei)其他(ta)組(zu)織(zhi)(zhi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，如心肌細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)、神經(jing)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)等。臍(qi)(qi)帶(dai)血(xue)(xue)(xue)造(zao)(zao)(zao)(zao)血(xue)(xue)(xue)干(gan)(gan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)具有(you)強(qiang)大的(de)(de)(de)(de)再生和(he)修(xiu)復能(neng)(neng)力(li)，這種能(neng)(neng)力(li)使得造(zao)(zao)(zao)(zao)血(xue)(xue)(xue)干(gan)(gan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)在多種疾病的(de)(de)(de)(de)治療中(zhong)展(zhan)現(xian)出巨大的(de)(de)(de)(de)潛力(li)，能(neng)(neng)夠為(wei)血(xue)(xue)(xue)液(ye)系(xi)(xi)統疾病的(de)(de)(de)(de)治療、組(zu)織(zhi)(zhi)修(xiu)復和(he)再生提供新的(de)(de)(de)(de)技術思路。

3、在(zai)臨床應用方面，例如(ru)對于(yu)(yu)白血(xue)(xue)(xue)(xue)病等血(xue)(xue)(xue)(xue)液系統惡性腫瘤，通(tong)過造(zao)(zao)血(xue)(xue)(xue)(xue)干(gan)細(xi)胞移(yi)植(zhi)可(ke)以替換患者(zhe)體內(nei)受損(sun)的造(zao)(zao)血(xue)(xue)(xue)(xue)系統，恢復正常的造(zao)(zao)血(xue)(xue)(xue)(xue)功能。此外，通(tong)過移(yi)植(zhi)造(zao)(zao)血(xue)(xue)(xue)(xue)干(gan)細(xi)胞可(ke)以促進心肌(ji)細(xi)胞的再生，改善心臟功能。最重要的是，造(zao)(zao)血(xue)(xue)(xue)(xue)干(gan)細(xi)胞還可(ke)以應用于(yu)(yu)神經系統的修(xiu)復，對于(yu)(yu)腦損(sun)傷、脊髓損(sun)傷等疾(ji)病的治療具(ju)有重要意義。

4、隨著臍(qi)帶(dai)造血干細胞(bao)在(zai)(zai)臨床應用中(zhong)的(de)(de)不斷(duan)開(kai)發，對促進其增殖的(de)(de)藥物(wu)需求也日益迫切(qie)。然而，臍(qi)帶(dai)造血干細胞(bao)的(de)(de)增殖能力有限，一定程度(du)上制(zhi)約了其在(zai)(zai)臨床上的(de)(de)應用范圍。其次，一些藥物(wu)組合物(wu)和培養基在(zai)(zai)臍(qi)帶(dai)造血干細胞(bao)增殖中(zhong)的(de)(de)研究仍處于初(chu)級階(jie)段，大多存在(zai)(zai)增殖效果較差、副作(zuo)用較大等問題(ti)。

5、因此，開(kai)發一種高效(xiao)的(de)、安全的(de)促進臍(qi)帶造血(xue)干細胞增殖的(de)藥物(wu)具有迫切的(de)需求和廣(guang)闊的(de)應用(yong)前景，并(bing)且對(dui)于推動臍(qi)帶造血(xue)干細胞在生物(wu)領域的(de)進步具有重要意義。

技術實現思路

1、為(wei)了克(ke)服現有技(ji)術(shu)的不足，本發明的目的在于提供活(huo)性肽組(zu)合物在制備促進臍(qi)帶(dai)造血干細胞增殖(zhi)藥物中(zhong)的應用。該(gai)活(huo)性肽組(zu)合物可有效提高(gao)臍(qi)帶(dai)造血干細胞的體外擴增能力。

2、本發明的目的采用如下技術方案實現(xian)：

3、活性肽組合物在制備促進臍帶造血干(gan)細胞增(zeng)殖藥物中的應用，所述活性肽為mots-c多肽和胸腺五肽。

4、進一步地(di)，所述(shu)mots-c多(duo)肽的氨基酸序列如(ru)seq?id?no：1所示：

5、met-arg-trp-gln-glu-met-gly-tyr-ile-phe-tyr-pro-arg-lys-leu-arg，

6、所述胸腺五肽氨基酸序(xu)列如(ru)seq?id?no：2所示：arg-lys-asp-val-tyr。

7、進一步(bu)地，將臍帶造血干細胞接(jie)種至(zhi)添加了(le)mots-c多肽和(he)胸腺五肽的(de)培養(yang)基中進行擴增培養(yang)。

8、進一(yi)步地，所(suo)(suo)述(shu)mots-c多肽(tai)在培(pei)養(yang)基中的(de)濃度(du)為60-105μg/ml，所(suo)(suo)述(shu)胸腺五肽(tai)在培(pei)養(yang)基中的(de)濃度(du)為4-8μg/ml。

9、進一步地，所(suo)述培養基(ji)為aim-v培養基(ji)，培養基(ji)中還添加5-20ng/ml?il-3、1-5％fbs、1-3％青霉素、1-3％鏈霉素。

10、進(jin)一步地，所述臍帶造血(xue)干細(xi)胞(bao)的接種(zhong)密度(du)為1-3×104個/ml。

11、進一步地，所述培養條件為(wei)37℃，5％co2。

12、相比(bi)現有技(ji)術，本發明的有益效(xiao)果(guo)在于：

13、本發明提供了(le)活性(xing)(xing)肽(tai)組(zu)合物在制備促(cu)進(jin)臍(qi)帶(dai)(dai)造(zao)血干(gan)細(xi)胞(bao)(bao)增(zeng)(zeng)殖藥物中的(de)(de)應用(yong)(yong)。該(gai)組(zu)合物不含有動物血清(qing)，降(jiang)低了(le)異體(ti)血清(qing)帶(dai)(dai)來的(de)(de)過敏反(fan)應，活性(xing)(xing)肽(tai)組(zu)合物中的(de)(de)mots-c多(duo)肽(tai)和胸腺(xian)多(duo)肽(tai)協同作用(yong)(yong)，促(cu)進(jin)臍(qi)帶(dai)(dai)造(zao)血干(gan)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)生(sheng)長，提高臍(qi)帶(dai)(dai)造(zao)血干(gan)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)增(zeng)(zeng)殖活性(xing)(xing)；同時，其生(sheng)物相容(rong)性(xing)(xing)好、安全性(xing)(xing)高，適合用(yong)(yong)于(yu)臨床治療，對(dui)于(yu)促(cu)進(jin)臍(qi)帶(dai)(dai)造(zao)血干(gan)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)體(ti)外擴(kuo)增(zeng)(zeng)能力具(ju)有關鍵的(de)(de)理論指導(dao)意義(yi)和實際應用(yong)(yong)價值，有助于(yu)推動臍(qi)帶(dai)(dai)血干(gan)細(xi)胞(bao)(bao)在生(sheng)物領域的(de)(de)發展。

1.活性肽(tai)組合物在(zai)制(zhi)備(bei)促進臍帶造血(xue)干細胞增殖藥物中的應用，其特征在(zai)于(yu)，所述活性肽(tai)為(wei)mots-c多(duo)肽(tai)和胸(xiong)腺五(wu)肽(tai)。

2.根據權利要(yao)求1所(suo)(suo)述活性肽組(zu)合(he)物(wu)在制備促進臍帶造血干細胞增殖(zhi)藥物(wu)中的應用，其特征(zheng)在于，所(suo)(suo)述mots-c多肽的氨基(ji)酸(suan)序列如(ru)seq?id?no：1所(suo)(suo)示：

3.根(gen)據權利要求1所述活性肽組合物在制備促(cu)進臍帶造血(xue)干細胞(bao)增殖藥物中(zhong)的應(ying)用，其特征在于，將臍帶造血(xue)干細胞(bao)接種至(zhi)添(tian)加了mots-c多(duo)肽和胸(xiong)腺五肽的培(pei)養基中(zhong)進行擴增培(pei)養。

4.根(gen)據(ju)權利要求3所(suo)述活性(xing)肽組合物(wu)在制備促進臍(qi)帶造血干細胞增殖藥物(wu)中(zhong)(zhong)的(de)應(ying)用，其特征(zheng)在于(yu)，所(suo)述mots-c多肽在培(pei)(pei)養基中(zhong)(zhong)的(de)濃度為60-105μg/ml，所(suo)述胸(xiong)腺五肽在培(pei)(pei)養基中(zhong)(zhong)的(de)濃度為4-8μg/ml。

5.根據(ju)權利要求3所述活性肽組合物(wu)在制備促進臍帶造血(xue)干細胞增殖(zhi)藥物(wu)中的應用，其特(te)征(zheng)在于，所述培(pei)養基為aim-v培(pei)養基，培(pei)養基中還(huan)添(tian)加5-20ng/ml?il-3、1-5％fbs、1-3％青霉素、1-3％鏈霉素。

6.根(gen)據權利要求3所(suo)述活性(xing)肽組合物(wu)在制備(bei)促進(jin)臍帶(dai)(dai)造血干細胞(bao)增殖(zhi)藥(yao)物(wu)中的應用，其特征在于(yu)，所(suo)述臍帶(dai)(dai)造血干細胞(bao)的接種(zhong)密(mi)度為1-3×104個(ge)/ml。

7.根據權利要求3所(suo)述(shu)活性肽組合(he)物在(zai)制備促進臍(qi)帶造血干細胞(bao)增殖藥物中的應用(yong)，其(qi)特征在(zai)于，所(suo)述(shu)培養條件為37℃，5％co2。