木瓜蛋白酶在鹵蟲卵去殼方面的應用
【專利摘要】本發明公開了一種木瓜蛋白酶在鹵蟲卵去殼方面的應用，方法為將浸泡后的鹵蟲卵置于0.01%?0.5%的木瓜蛋白酶溶液中，室溫下攪拌2?6小時，卵顏色由褐色變為橙紅色時將卵與溶液分離，用海水沖洗后即得去殼卵。本發明屬于生物法去殼，不引入化學原料，對去殼卵卵膜損傷小，對后續孵化或直接投喂無不良影響，且操作簡單。
【專利說明】
木瓜蛋白酶在鹵蟲卵去殼方面的應用
技術領域
[0001] 本發明屬于鹵蟲卵應用技術領域，具體涉及木瓜蛋白酶在鹵蟲卵去殼方面的應 用。
【背景技術】
[0002] 鹵蟲又叫豐年蟲，是世界性分布的小型甲殼類，生活于鹽湖、鹽場等高鹽水域中。 鹵蟲卵是優質的水產育苗餌料，在水產養殖業具有重要作用。鹵蟲卵殼是含鐵脂蛋白，魚蝦 幼苗無法消化，因此一般需要先孵化出鹵蟲幼體，然后再將幼體作為餌料投喂。孵化后的卵 殼和幼體不易徹底分離，易造成部分已孵化幼體隨卵殼倒掉而損耗或卵殼和幼體一起被采 食導致魚蝦幼苗腸梗阻死亡。鹵蟲卵去殼后可以直接投喂，也可以孵化出幼體。由于沒有卵 殼，可以減少幼體破殼時的能量消耗，有利于保留更多營養。在魚蝦育苗中，鹵蟲卵的費用 往往占育苗場50%_70%成本。通過去殼的方法，可以提高孵化率并使鹵蟲幼體保留更多營 養，同時還可以利用大量孵化率低的低質卵，降低育苗成本，對育苗場意義重大。
[0003] 目前鹵蟲卵去殼多采用化學法，即用次氯酸鈉及氫氧化鈉溶液溶解卵殼，去殼后 反應無法立即終止，需要將去殼卵撈出清洗除去余氯，此過程中溶液的余氯繼續對脫殼卵 作用，損傷較大；同時在去殼過程中溶液溫度容易升高，影響孵化率，需要采取降溫措施;操 作過程對孵化率影響很大，工藝不穩定;且卵表面余氯難以徹底去除，投喂時有氯特有氣味 影響水產幼苗采食，往往還需要添加誘食劑。
[0004]木瓜蛋白酶是一種低特異性蛋白水解酶，屬于巰基蛋白酶，它具有酶活高、熱穩定 性好、天然衛生安全等特點。廣泛地存在于番木瓜的根、莖、葉和果實內，其中在未成熟的乳 汁中含量最豐富。木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，可水解蛋白質和多肽中精氨酸和賴 氨酸的羧基端，并能優先水解那些在肽鍵的N-端具有二個羧基的氨基酸或芳香L-氨基酸的 肽鍵，因此在食品、醫藥、飼料、日化、皮革及紡織等行業得到廣泛應用。
【發明內容】
[0005] 本發明的目的在于提供一種菠蘿蛋白酶在鹵蟲卵去殼方面的應用，解決化學法去 殼存在的問題，改善去殼卵質量。
[0006] 1.將商品鹵蟲卵用淡水浸泡2-4小時，充氣攪拌，使卵充分吸水膨脹； 2 .分離出鹵蟲卵，將其置于10倍重量的0.01%-0.5%木瓜蛋白酶溶液中，室溫下120r/ mi η攪拌； 3. 去殼時間2-6小時，觀察卵的顏色由褐色逐漸變為橙紅色，將卵與酶溶液分離； 4. 將去殼卵置于50倍以上重量海水中，將充氣頭置于水底，控制進氣量使全部水體翻 滾，充氣攪拌沖洗10分鐘，靜置，待分層后分離去殼卵，即可用于孵化或直接投喂。
[0007] 上述過程中所用淡水如果為自來水，需提前進行除氯，減輕對卵的損傷。
[0008] 所述步驟2中木瓜蛋白酶溶液濃度進一步優選為0.08%-0.2%。
[0009] 所述步驟3中去殼時間進一步優選為2-3小時。
[0010] 與其他蛋白酶相比，去殼卵卵膜對木瓜蛋白酶的抗性強，因此可不使用專門的抑 制劑終止反應。
[0011] 與現有技術相比，本發明的有益效果： 本發明屬于生物法去殼，所用原料為天然產物，不引入化學原料，對去殼卵無化學污染 且對去殼卵卵膜損傷小，對后續孵化或直接投喂無不良影響，降低了操作難度，而且去殼效 果穩走。
【具體實施方式】
[0012] 下面通過實施例對本發明作進一步詳細描述，但是本發明并不限于下述實施方 式。
[0013] 實施例1: 1. 將500克鹵蟲卵用淡水浸泡3小時，充氣攪拌，使卵充分吸水膨脹。如果所用淡水為自 來水，需提前進行除氯，減輕對去殼卵的損傷； 2. 分離出鹵蟲卵，將其置于5升0.12%的木瓜蛋白酶溶液中，酶活力100萬U/g，室溫下 120r/min 攪拌； 3. 去殼時間2小時，當卵的顏色由褐色逐漸變為橙紅色，將卵與酶溶液分離； 4. 將去殼卵重新置于30升海水中，將充氣頭置于水底，控制進氣量使全部水體翻滾，充 氣攪拌沖洗10分鐘，靜置，待分層后分離去殼卵，即可用于孵化或直接投喂。
[0014]實施例2:不同去殼方法對鹵蟲卵孵化的影響 采用產地為山東的同批次鹵蟲卵，在自然光照射、鹽度30%。、溫度28°C，孵化時間24h， 以及其他條件一致的情況下，取兩種方法在不同處理時間對應的去殼率及相應去殼卵的孵 化率，來對比兩種不同的去殼方法對鹵蟲卵孵化的影響，結果如表1所示。其中：對照組為正 常孵化，不去殼;化學法為次氯酸鈉和氫氧化鈉聯用;兩種去殼方法的孵化率均為去殼卵孵 化率。
[0015] 表1不同處理方法對鹵蟲卵孵化的影響
使用化學法去殼過程中，去殼卵的孵化率與去殼率成負相關，即去殼時間越長則去殼 率越高，孵化率越低。雖然去殼率低時的去殼卵孵化率比對照組高，但此時還有相當部分的 卵沒有去殼，所以卵的總體孵化率提高較小；當完全去殼時，總體孵化率反而比正常孵化 低。采用本發明方法去殼，作用溫和，對卵損傷小，在去殼率高時的去殼卵孵化率依然較高， 使卵的總體孵化率有較大提高，且直接投喂或用于孵化均適宜。
【主權項】
1.木瓜蛋白酶在鹵蟲卵去殼方面的應用，其特征在于:將浸泡后的鹵蟲卵置于0.01%-0.5%的木瓜蛋白酶溶液中，室溫下攪拌2-6小時，卵顏色由褐色變為橙紅色時將卵與溶液分 離，用海水沖洗后即得去殼卵。
【文檔編號】A01K67/033GK105900934SQ201610314078
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年5月13日
【發明人】吳闖, 齊佳慧
【申請人】遼寧石油化工大學